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生命科学
酶联免疫吸附测定
流式细胞术
细胞分选
细胞培养
酶联免疫吸附测定

酶联免疫吸附测定 (ELISA) 是一种广泛应用于生物学和医学科学的免疫酶技术,用于定量测定各种生物基质样品中的抗体、抗原、糖蛋白、糖脂等分子。ELISA检测法依赖于抗原-抗体相互作用,结合酶/底物的催化作用,可以特异性识别复杂生物基质中目标分子。目前主要有4种形式的 ELISA 方法,包括直接 ELISA检测法、间接 ELSIA检测法、夹心 ELISA检测法和竞争性 ELSIA检测法。无论采用哪种形式,重要的是选择合适的固定抗原或捕获检测抗体对,以确保方法的特异性和灵敏度。

流式细胞术

流式细胞技术 (FCM) 是利用流式细胞仪将单个细胞传送通过光测量点,经不同波长的散射光,检测到具有荧光标记抗体(和细胞表面抗原组合)的细胞,并在细胞图上记录出来。 FCM 的优势是在于可以在短时间内(几十秒到几分钟)测量大量单个细胞,从而可以揭示细胞群的异质性,并且可以识别、量化和分类不同的细胞亚群以供进一步研究。 FCM越来越多地应用于细胞周期、细胞生理学、免疫表型等研究领域。

细胞分选

磁性细胞分选技术是利用磁性粒子偶联识别细胞表面抗原的高特异性抗体分离特定亚群的活细胞。基于磁场的磁性选择和抗体-抗原的相互作用,将目标细胞从血液或组织中分离出来。该技术被广泛用于从人和动物组织或血液样本中分离全T细胞、CD4+T细胞、单核细胞、B细胞、干细胞、NK细胞、树突细胞、内皮细胞、肿瘤细胞、白细胞、粒细胞等。特定的细胞亚群从磁珠中释放出来,几乎不受任何损伤,可直接用于细胞培养、流式细胞术和基于细胞的检测等下游应用。

细胞培养

细胞培养技术使得在实验室内体外模拟细胞分化和代谢功能成为可能。

原代细胞是从人类或动物供体组织中直接分离出来的细胞,已高度分化且接近起源组织,但通常不具有增殖性。而永生化的细胞系是从肿瘤或组织中分离出来的、可在体外培养并稳定增殖的细胞,但通常在遗传学和表型上与其起源细胞存在较大的差异。

就培养方法而言,多数源自组织的细胞,比如胚胎 (hESCs) 和间充质干细胞、纤维细胞或肝细胞,需要在细胞培养瓶或多孔板或滚瓶的表面贴壁生长。贴壁培养的细胞增殖受到培养容器的可用表面积的限制。血液细胞系或经驯化后的一些组织细胞也可在摇瓶中悬浮生长。经改造的工程细胞系可悬浮培养于生物反应器中,用于大规模生产生物类药品。

应用科学
药物筛选
遗传毒性研究
生物分析
室间质评与能力验证
药物筛选

新药开发过程通常包括临床前研究、临床试验、报批和生产上市4个阶段。药物代谢研究在新药开发的前两个阶段具有重要的指导意义,尤其是在代谢信息不明确的开发早期。

通过利用各种体外代谢模型对候选化合物的代谢特性(如代谢稳定性、代谢产物生成、代谢表型、酶抑制IC50等)进行高通量筛选,可以对代谢过快或生成毒性代谢物的候选化合物进行结构改良,或通过合成活性代谢物或模拟活性代谢物的结构得到新的候选化合物。

与体内代谢研究相比,体外代谢研究可在新药研发早期利用候选化合物的体外代谢参数合理预测候选化合物的体内药动学行为,指导后期药效、药动以及安全性评价的模型选择,缩小体内研究的筛选范围。

遗传毒性研究

遗传毒性研究(Genotoxicity Study)是药物非临床安全性评价的重要内容,与其他研究尤其是致癌性、生殖毒性等研究有着密切的联系,是药物进入临床试验及上市的重要环节。拟用于人体的药物,应根据受试物拟用适应症和作用特点等因素考虑进行遗传毒性试验。遗传毒性试验是指用于检测通过不同机制直接或间接诱导遗传学损伤的受试物的体外和体内试验,这些试验能检测出DNA损伤及其损伤的固定。

遗传毒性试验方法有多种,根据试验检测的遗传终点,可将检测方法分为三大类,即基因突变、染色体畸变、DNA损伤;具体的试验内容包括细菌回复突变试验(Ames试验),体外染色体畸变试验,体外微核试验,体外小鼠淋巴瘤L5178Y细胞TK基因突变试验,HGPRT基因突变试验,彗星试验等。

IPHASE品牌针对遗传毒性各项试验,分别开发出遗传毒性Ames试剂盒,体外染色体畸变试剂盒,体外微核试验试剂盒,TK染色体畸变试剂盒,HGPRT基因突变试剂盒,彗星试验试剂盒等,大大提高各个遗传毒性试验的完成效率,省去试验试剂配制准备验证等各个环节,大大缩短实验人员实验时间。

生物分析

质谱检测中,不可避免的会遇到基质效应,为了验证基质带来的影响,需要使用空白基质,若分析物为外源性物质(大多数药物,环污染物等)都可以使用正常人或动物的生物样品(血浆,血浆,尿液,胆汁等)作为正常的BLANK,单如果分析物为内源性物质(正常人或动物体内本身含有的皮质醇,胆红素,维生素等),就很难获得空白基质,这种情况下,想要去除生物样本中的内源性物质很难完成,可以使用人工基质,模拟人体或动物体内环境配置而成,成分明确,有效解决内源性物质干扰问题。

IPHASE品牌空白生物基质产品,包括不同种属动物空白血清,血浆,尿液,胆汁,粪便,组织等空白基质,人工血浆,人工尿液,人工胃液,人工小肠液等人工基质,为创新药物研发机构生物分析研究,大分子药物生物分析,小分子药物生物分析,如方法学开发,方法学确证,药代动力学分析,毒代动力学分析等提供专业产品与专业服务。

室间质评与能力验证

室间质量评价也被称作能力验证,是国际公认的临床实验室全面质量管理的重要组成部分,也是医疗机构质量管理的重要内容。室间质量评价是为确定某个实验室进行某项特定校准或检测能力以及监控其持续能力而进行的一种实验室间的比对。

IPHASE拥有专业的综合分子检测平台,十余年分析检测经验,长期为中国疾病预防控制中心,国家食品安全风险评估中心,卫健委临床检验中心,北京市临床检验中心提供能力验证相关标准物质与质控品。

技术应用:
IPHASE/汇智和源 成功推出C57BL/6小鼠原代肝细胞 2024-03-21
C57BL/6,常被称作“C57 black 6”、“C57”或者“black 6”(标准简称为B6),是一种常见的近交品系实验鼠。在遗传学试验中广泛用作转基因鼠以模拟人类的基因缺陷类疾病。因其可用作同类系、易于繁殖和体格健壮等特性,是使用范围最广、销量最好的一支鼠株品种。 一、C57BL/6小鼠来源及特性 1921年C.C.Little对Miss Abby Lathrop品系近亲交配,育成数个近交系动物,后以其中57号雌鼠与52号雄鼠交配得到C57,且将C57中毛色固定为棕色者称为C57BR(Brown),固定为黑色者称为C57BL(Black)。C57小鼠亚系有很多,C.C.Little于1937年进一步分离出了6号系,标记为C57BL/6。 作为被认为是“标准”的近交系,C57BL/6小鼠为许多突变基因提供了遗传背景,并具备特殊的生理特性。 此外,C57BL/6作为实验动物模型,其结果精度高、可比性好、应激反应均一。因此,C57BL/6成为了第一个完成基因组测序的小鼠品系,常用于心血管生物学、发育生物学、遗传学、免疫学、生理学、肿瘤学、神经生物学和神经学等领域研究;也被用于研究衰老、神经退行性疾病(如阿尔茨海默病)、代谢疾病(如糖尿病和肥胖疾病模型和动脉粥样硬化)、转基因小鼠、听力损失、眼睛异常、免疫耐受性、放射敏感性、补体活性、微生物和寄生虫感染等。 二、C57BL/6小鼠亚型比较 1947年,美国Jackson Laboratory从Little引进C57BL/6进行培育,命名为C57BL/6J;1951年,美国国立卫生研究院(National Institute of Health,NIH)从Jackson Laboratory引入了C57BL/6J第32代并形成了亚系C57BL/6N。不同亚系间小鼠差别也较多,需根据不同的试验目的来选择合适的小鼠品系。 C57BL/6J C57BL/6N 基因组序列 两者相差34个编码SNP,2个编码small indels,146个非编码SNP,54个非编码small indels。 眼睛 视力相对较好,平均动静脉数较大,易发生小眼畸形及其它相关疾病。 视力减退,眼底白班 心血管 收缩压更高 脉搏率更高 新陈代谢 产热量或代谢率降低,糖耐受量降低 耗氧量较高,葡萄糖耐受量较低,但是循环葡糖糖水平及正常糖耐受量相对较高。 神经、行为和感觉 运动协调性相对较好 运动协调性明显受损 临床化学 血浆中尿素和电解质钠、钾和氯化物显著较高 血浆中尿素和电解质钠、钾和氯化物较低 免疫功能与过敏 对李斯特菌饼有抵抗力,趋化因子受损,免疫细胞浸润和病原体清除受损。 较C57BL/6J没有相应免疫功能或过敏反应 听力 发生迟发性听觉丧失 发生迟发性听觉丧失 此外,C57BL/6J和C57BL/6N作为试验动物模型选择,两者还有些许差异。 三、C57BL/6小鼠原代肝细胞的重要性 原代肝细胞(Primary hepatocytes)是指从动物肝脏直接分离的肝实质细胞,具有不可替代的优势。 原代肝细胞与体内环境保持一致,酶量与辅助因子水平浓度与正常生理浓度贴合,满足在接近生理状态情况下研究药物代谢和毒性的需求,真实反应了体内的代谢情况。同时,利用原代肝细胞在体外进行研究,无须担心动物实验的伦理问题,也减少了动物实验所需的成本开支。目前,原代肝细胞已广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学和遗传学研究等;同时,还可应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢、毒理研究和癌症药物的研究等,在生物医药领域有不可替代性作用,市场前景广阔。 C57BL/6小鼠作为常见的实验动物模型,拥有独特且优异的生理特性。因此,研究并开发其原代肝细胞对于多领域学科、多维度疾病的治疗和药物开发都具有至关重要的意义! 四、IPHASE相关产品 鉴于此,IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,凭借先进的设备,专业的技术人员和多年研发的经验,成功推出C57BL/6品系小鼠悬浮原代肝细胞,为客户进行药物开发等试验提供新选择! 名称 规格 悬浮C57BL/6小鼠肝细胞 2 million IPHASE技术人员成功从混合雄性C57BL/6小鼠中分离得到悬浮原代肝细胞,利用药物稳定试验测试C57BL/6小鼠悬浮原代肝细胞的酶活。技术人员以终浓度为1μM维拉帕米为阳性底物,分别测定0min、5min、15min、30min、60min及90min下药物的剩余量,发现药物随着时间延长而逐渐减少,并最终得到维拉帕米的半衰期在28.51min,其体外固有清除率为0.0486 ml/min/million cells,符合试验结果要求,确认IPHASE悬浮C57BL/6小鼠肝细胞分离成功! 合规性 IPHASE生产产品的组织均由正规渠道获得,来源清晰。 安全性 生产动物经过传染源检测,保证产品质量安全。 活性高 IPHASE技术人员以维拉帕米为底物验证细胞色素CYP450酶的活性,结果表明满足顾客需求。 复苏率高 冻存复苏率可达90% 以上。 可定制 可根据客户特殊需求,提供特殊种属、特殊组织细胞的定制服务。 除最新成功分离得到的悬浮C57BL/6小鼠肝细胞,IPHASE技术人员亦从人、猴、犬、大鼠、小鼠、猪、兔等多个种属中分离得到相应的悬浮/贴壁原代肝细胞,并以阳性药物为底物,通过药物稳定性试验测定其酶活性,结果均满足客户需求,可为不同领域客户提供多种属、多规格的原代肝细胞,助力客户药物开发、试验顺利。 产品描述 规格 人原代肝细胞 4-6million 食蟹猴肝细胞 2/5 million 恒河猴肝细胞 2/5 million 比格犬肝细胞 2/5 million SD大鼠肝细胞 2/5 million ICR/CD-1小鼠肝细胞 2/5 million 小型猪肝细胞 2/5 million 新西兰兔肝细胞 2/5 million 肝细胞代谢培养基 10mL 肝细胞复苏培养基 10mL 肝细胞铺板培养基 20mL 肝细胞维持培养基 50mL IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES/汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
IPHASE/汇智和源 细胞自我消化器官——溶酶体 2024-03-14
随着生物技术的不断发展,小分子化合物、寡核苷酸药及生物药等靶向抗肿瘤药物的开发已取得飞速进展,其中siRNA/RNAi及ADC类药物更是多家药企开发抗肿瘤药物的热门首选。在体外进行相关试验是检验药物稳定性及安全性的必要手段,而溶酶体就是siRNA/RNAi及ADC类药物开发过程中不可或缺的体外代谢研究品。 一、溶酶体的简介 溶酶体(Lysosomes)是真核细胞中分解蛋白质、核酸及多糖等生物大分子且具有单层膜的细胞器,在1955年首次被比利时学者Cristian de Duve(1917-2013)等人在大鼠肝细胞中发现。溶酶体形状多种多样,通常为0.025~0.8微米的泡状结构,其内含有酸性磷酸酶、核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶、组织蛋白酶及乙酰基转移酶等60余种水解酶,是在酸性区域具有最适PH的水解酶组,且水解酶的最适PH为3.5~5.5。鉴于溶酶体的结构特异性和酸性工作环境,通常将对酸性磷酸酶活性为阳性的物质鉴定为溶酶体。 图片来源:百度百科 作为在酸性区域工作的溶酶体,其酶含有三种特点: 1)溶酶体表面高度糖基化,有助于保护自身不被酶水解。膜蛋白多为糖蛋白,溶酶体膜内表面带负电荷,有助于溶酶体中的酶保持游离状态。这对行使正常功能和防止细胞自身被消化有着重要意义; 2)所有水解酶在pH值=5左右时活性最佳,但其周围胞质中pH值=7.2。溶酶体膜内含有一种特殊的转运蛋白,可以利用ATP水解的能量将胞质中的H+(氢离子)泵入溶酶体,以维持其pH值=5; 3)只有当被水解的物质进入溶酶体内时,溶酶体内的酶类才行使其分解作用。一旦溶酶体膜破损,水解酶逸出,将导致细胞自溶。 图片来源:百度百科 二、溶酶体的功能和分类 溶酶体的主要作用是消化作用,是细胞内的消化器官,细胞自溶、防御及对某些物质的利用均与溶酶体消化作用相关。其执行功能有二点,分别是与食物泡融合将食物消化成生物大分子和消化机体自我更新过程中形成的衰老的细胞器或生物大分子。 溶酶体根据完成其生理功能的不同阶段可分为初级溶酶体(Primary lysosome)、次级溶酶体(Secondary lysosome)和残体(Residual body)。 三、溶酶体和毛状体的区别 作为抗肿瘤药物开发不可或缺的体外产品,有些客户会发现文献资料中同时存在溶酶体(Lysosomes)和毛状体(Tritosomes),就会产生疑惑,什么是毛状体?它和溶酶体的区别是什么?什么情况下选择毛状体/溶酶体?接下来,就让我们具体分析一下这两者的差异。 根据上文,我们已经很清晰地了解到溶酶体是单层膜结构,其内含多种水解酶,是体外验证ADC及寡核苷酸类药物不可或缺的产品。鉴于此,开发分离溶酶体的技术势在必得,然而,溶酶体具有与线粒体非常相似的密度,这就为以前分离获取溶酶体增加了难度。Triton WR 1339/Tyloxapol(四丁酚醇/泰洛沙伯)药物使用应运而生。 1960年,科学家发现蔗糖中线粒体和溶酶体密度非常接近难以分离,而当Tyloxapol被运输到溶酶体后改变了溶酶体的脂质组成,导致结合了Tyloxapol的溶酶体密度更轻,并可使用蔗糖密度梯度离心法分离溶酶体和线粒体。因此,结合了Tyloxapol的溶酶体被人们称为Tritosomes(毛状体),之后渐渐演变为了研究纯化和富集溶酶体时的常用技术。一定程度上,毛状体也是更高纯度的溶酶体。 四、IPHASE产品 综上所述,IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,研究分离出了高纯度、适用范围广的肝溶酶体及其配套代谢缓冲液,为广大ADC类、寡核苷酸类药物开发客户提供了国产新选择,助力广大客户体外药物研究! 货号 产品名称 规格 0151A1.03 混合人肝溶酶体 250μL,2mg/ml 0151B1.01 混合食蟹猴肝溶酶体 250μL,2mg/ml 0151D1.11 混合SD大鼠肝溶酶体 250μL,2mg/ml 0151E1.01 混合ICR/CD-1肝溶酶体 250μL,2mg/ml 0151C1.01 混合比格犬肝溶酶体 250μL,2mg/ml 011700.08 溶酶体代谢缓冲液 A液1mL,B液10μL 高纯度 IPHASE肝溶酶体出厂均经酸性磷酸酶验证,保证溶酶体纯度。 适用范围广 IPHASE肝溶酶体采用试剂盒检测法,同时检测了组织蛋白酶B和核酸酶的活性,可同时满足ADC类药物和小核酸类药物开发需求。 专业性 IPHASE提供的产品,均由专业人员操作执行,每个批次的产品均提供相应COA。 服务好 高质量的售后服务,确保试验一路绿灯。 IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为遗传毒性研究提供便捷产品。此外,IPHASE/汇智和源可提供特殊产品的定制服务,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES/汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
IPHASE/汇智和源 无菌血浆:助力大分子药物血浆稳定性研究 2024-03-08
在当今的生物医药领域,大分子药物的研究和开发已成为一个热门话题。然而,药物的稳定性问题一直是制约药品质量和安全的重要因素。血浆稳定性作为药物稳定性的重要组成部分,对于药物的疗效和安全性具有重要意义。因此,研究如何提高大分子药物的稳定性,特别是其在血浆中的稳定性,对于生物医药领域的发展至关重要。 一、生物大分子药物 生物大分子药物是指一类利用现代生物技术方法生产的源自生物体内并被用于疾病的诊断、治疗或预防的生物大分子,狭义上也称为生物技术药物,随着分子生物学、基因工程和基因组学的研究发展,生物技术药物得以迅猛发展,其种类也日趋增多。目前生物大分子药物包括DNA重组技术生产的蛋白质、多肽、酶、激素、疫苗、单克隆抗体(mono-clonal antibody,mAb)和细胞因子药物,与传统小分子药物(相对分子质量为200~700)相比,其相对分子质量(1500~150000)较大,不易被吸收,主要用于治疗肿瘤、艾滋病、心脑血管病等重大疾病。 特性 生物大分子药物 多肽和蛋白 核酸 单克隆抗体 相对分子质量 1500~70000 6000~18000 150000 物理化学性质 水溶性好,带电状态差异大。 水溶性好,多带负电荷。 水溶性好,带电状态差异大。 代谢 蛋白酶 核酸酶 蛋白酶 药物-药物相互作用 无 靶向性 靶向 生物样本分析对象 总蛋白和多肽 总核苷酸 总抗体 特性 传统小分子药物 生物大分子药物 抗体药物偶联物 相对分子质量 200~700 150000 物理化学性质 溶解性差异大,带电状态差异大。 水溶性好,带电状态差异大。 代谢 CYP450酶系 蛋白酶和CYP450酶 药物-药物相互作用 广泛存在 存在 靶向性 几乎无 靶向 生物样本分析对象 小分子药物本身或活性代谢产物 连接物、总抗体、小分子药物 二、血浆稳定性研究的重要性 在药物开发过程中,对先导化合物进行肝代谢稳定性和血浆代谢稳定性等研究是评价药物能否成药的重要因素之一。 相较于大家耳熟能详的肝代谢稳定性研究,血浆代谢稳定性研究易被人们忽视。然而,在血浆中存在着诸如胆碱酯酶、醛羧酶、脂肪酶、脱氢肽酶、碱性和酸性磷酸酶等多种水解酶,如果一个化合物对这些酶中的一种具有亲和力,并且在合适的位置上具有可被水解的基团,那么它在血浆中就能被分解,从而影响生物测试结论的准确性或者使其在体内达不到有效治疗浓度。目前已发现易在血浆中分解的常见基团有:酯、酰胺、氨基甲酸酯、内酰胺、内酯及磺酰胺等。 目前已知部分生物大分子药物在血浆中会受到如羧基酯酶、肝酯酶等多种酶的降解,造成高清除率的现象;此外,血浆中的离子、蛋白质等成分也可能与大分子药物发生相互作用,进而影响药物的稳定性。因此,研究生物大分子药物的血浆稳定性对于药物开发具有非常重要的意义。 三、IPHASE相关产品 鉴于大分子药物的特殊性,常规普通血浆无法保证长效孵育后的无污染情况,因此,IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,通过过滤等方式开发、生产多种属、多抗凝剂的无菌空白血浆,持续助力大分子药物的血浆稳定性研究! 产品 规格 保存方式 无菌空白人血浆 5 ml 冷冻 无菌空白食蟹猴血浆 5 ml 冷冻 无菌空白比格犬血浆 5 ml 冷冻 无菌空白SD大鼠血浆 5 ml 冷冻 无菌空白ICR/CD-1小鼠血浆 5 ml 冷冻 多种属 本司可提供人、猴、犬、大鼠、小鼠等多个种属及不同抗凝剂的无菌血浆 安全性 本司采集血浆的动物均经过传染源检测,使用更安全、放心 合规性 由合规途径获得,来源清晰可追溯 专业性 采血及无菌操作均由专业人员进行,保障产品质量 服务好 高质量的售后服务,确保试验一路绿灯 可定制 可根据客户的特殊需求“专人专供” IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得    奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES/汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
IPHASE课堂开课啦 | Ames试验常见问题与解答! 2024-02-21
2024年度IPHASE课堂  第 一 期 云端交互共探索·赋能研发新机遇 本年度第一期IPHASE课堂即将开课啦!3月5日,IPHASE/汇智和源线上交流会将围绕Ames试验常见问题与解答,与各位与会嘉宾进行深入探讨,我们期待您的参加! 课程简介 细菌回复突变试验(Bacterial Reverse Mutation Test),又称Ames试验,是以营养缺陷型的突变体菌株为指示生物检测基因突变的体外试验,可检测一个或数个碱基对的置换、增加或缺失造成的点突变,在食品、药品、化学品、化妆品、农药、医疗器械等多个领域中得到了广泛的应用。 本次课堂,我们将围绕以下议题与参会嘉宾展开深入探讨: ·Ames试验简介 ·Ames试验关键点把控 ·Ames试验常见问题与分析 主讲嘉宾 王艳萍 硕士研究生 IPHASE-技术总监 举办时间 3月5日 19:00-20:00 联系电话 15910545801 报名方式 关注微信公众号【IPHASE】回复“我要进群” 发    文    章    得     奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES/汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
IPHASE/汇智和源 吞噬能力最强的免疫细胞——巨噬细胞 2024-02-05
巨噬细胞(Macrophages,mø)是一类具有吞噬和消化能力的白细胞,是免疫系统中的重要组成部分,具有强大的吞噬能力。作为单核-巨噬细胞系统的一部分,它们负责吞噬和清除体内的寄生虫、外来的细菌,以及异常或衰老的细胞。同时,巨噬细胞还具有参与调控炎症、促进伤口愈合、清除细胞残骸等功能,对维持机体免疫自稳和监视异常细胞起着关键作用。因此,在体外分离、纯化并扩增巨噬细胞对于免疫治疗等领域的研究具有重要意义! 一、巨噬细胞的简介 巨噬细胞也称组织细胞(histocyte),是由血液中的单核细胞穿出血管后分化而成,随后穿过血管内皮迁徙到不同组织,最终分化为具有组织特异性的巨噬细胞。在单核细胞分化为巨噬细胞的过程中,其体积增大、溶酶体增多,吞噬和消化能力逐渐增强,逐渐拥有发挥抵抗外界病菌入侵的能力。同时,还伴随着部分细胞表面受体增加、部分细胞内酶表达增强及分泌过氧化氢和超氧离子能力降低等变化。 在不同组织中巨噬细胞具有不同的名。 组织类型 名称 肝 Kupffer细胞 肺 Alveolar巨噬细胞 结缔组织 组织细胞 大脑神经组织 小胶质细胞 骨 破骨细胞 皮肤 朗格汉斯细胞 脂肪组织 脂肪组织巨噬细胞 结缔组织 组织巨噬细胞 淋巴结 淋巴结巨噬细胞 脾白髓 脾巨噬细胞 巨噬细胞分布广泛,在疏松结缔组织内数量较多。巨噬细胞形态多样,因其功能状态不同而变化,一般为圆形或椭圆形,并有短小突起,功能活跃者常伸出较长伪足而呈不规则形。胞核较小,呈圆形或椭圆形,着色较深。扫描电镜下,细胞表面有许多微皱褶和突起,呈彩球状。透射电镜下,胞质含有大量初级溶酶体、次级溶酶体、吞噬小泡和吞噬小体,此外还有较发达的高尔基复合体、少量线粒体和粗面内质网等。巨噬细胞在体外培养时可附着在玻璃和塑料表面,其胞质非特异性脂酶阳性,常以此收集和鉴别巨噬细胞 。 二、巨噬细胞的分型 对于巨噬细胞来说,不同的因素如信号分子、生长因子、转录因子及小生境信号等均会影响其活化状态和表型分类。一般来说,巨噬细胞可以根据其活化状态和发挥功能进可分为两种亚型:M1型即经典活化的巨噬细胞(classically activated macrophage),和M2型即替代性活化的巨噬细胞(alternatively activated macrophage),针对巨噬细胞的不同刺激,M2型又可以分为M2a、M2b、M2c、M2d。两种亚型的巨噬细胞具有不同的功能。 图片来源:Int Immunopharmacol . 2019 May;70:459-466. doi: 10.1016/j.intimp.2019.02.050. Epub 2019 Mar 9. M1 M2 激活因子 INF-γ、LPS Th-2细胞因子(IL-4、IL-13)、免疫复合物、IL-10 细胞因子 IL-12、IL-23、活化的细胞可以产生iNOS,炎症细胞因子(TNF、IL-6、IL-12、IL-15)在Th1反应中成为诱导性及效应性细胞。 高表达清道夫受体(CD163、甘露糖受体、半乳糖型受体),IL-10、IL-8、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、干扰素诱导蛋白10(IP-10)、巨噬细胞炎性蛋白(MIP-1)。 趋化因子 CXCL1、2、3、5、8、9、10  CCL2、3、4、5、11、17 CCL24、CCL17、CCL22、CCL2 三、巨噬细胞功能 巨噬细胞的功能主要表现在三个方面:吞噬作用、抗原呈递作用和分泌生物活性物质以参与免疫应答。 吞噬作用 当病原体微生物、寄生虫或其他外来的抗原进入机体后,可首先被巨噬细胞吞噬并清除。在吞噬过程中,巨噬细胞在微管、微丝和肌动蛋白等细胞骨架的参与下,通过伸出伪足来包裹并摄入病原体或其他异物。同时,细胞内膜发生内陷、形成吞隐小泡等变化,促进巨噬细胞的包裹和吸收吞噬。 图片来源:https://view.inews.qq.com/k/20230506A00PB300?no-redirect=1&web_channel=wap&openApp=false 抗原呈递作用 巨噬细胞通过捕获、内吞和表达自身或外来抗原并将其提呈给其他免疫细胞来作为启动免疫反应的一部分,并且还分泌不同的趋化因子和各种强大的物质来影响适应性免疫细胞的激活。 分泌生物活性物质以参与免疫应答 巨噬细胞分泌细胞因子、补体蛋白和酶等多种生物活性物质。这些物质通过调节其他免疫细胞的活性和功能来参与免疫应答和炎症反应。例如,白细胞介素(IL)可以激活和调节T细胞、B细胞和NK细胞的活性;肿瘤坏死因子(TNF)可以诱导炎症反应并杀死被感染的细胞。 因此,作为唯一能够通过不同机制来对抗病原体的巨噬细胞,对其进行体外收集、纯化并扩增来研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫具有重要意义! IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得     奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES/汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
免疫系统的刹车——Treg细胞 2024-01-31
调节性T细胞(Regulatory cells,Tregs ),早期亦称为Suppressor T cells,是一群以表达Foxp3、CD25、CD4为细胞表型特征的T细胞亚群,是维持机体免疫耐受的重要因素之一。胸腺是Treg细胞发育的主要部位。   图片来源:Foxp3-dependent programme of regulatory T-cell differentiation   一、Treg细胞的基础功能   Treg细胞由胸腺产生后输出至外周,并通过主动调节的方式抑制存在于正常机体内潜在的自身反应性T细胞的活化与增殖,从而调节机体的免疫。Treg细胞具有免疫抑制作用,能够抑制其它免疫细胞的免疫应答,是自我耐受的主要控制者,作为CD4+细胞的一部分,Treg细胞同其它常规辅助T细胞亚群如Th1、Th2、Tfh、Th17和Th22等相互配合,常规辅助T细胞亚群介导机体免疫应答,而Treg细胞则通过抑制促炎效应功能来限制过度免疫应答,从而维持机体稳态。简而言之,Treg 细胞负责调控免疫系统的停止,从而防止机体过度免疫反应。   因此,如果Treg 细胞出现缺失或者功能异常的现象,就会导致机体自身免疫性疾病的发生。   图片来源:Nature Medicine   二、Treg细胞的分类和作用机制   Treg细胞根据发育来源,可分为自然调节性T细胞(n Tregs)和诱导产生的适应性调节性T细胞(a Tregs或i Tregs)。前者主要包括CD4+ Treg 细胞,后者 包括Tr1 细胞、Th3 细胞和CD8+ Treg 细胞等多种亚型;同时在先天免疫和适应性免疫间还有一个特殊的自然杀伤性T细胞-NKT细胞。   适应性调节 适应性调节 适应性调节 Tr1 Th3 CD8+ Tregs 表型 CD4+,CD25 CD4+,CD25+, from CD25- precursors CD8+,CD25+ 标志物 CD25low-variable;CD45RBlow CD25low-variable;CD45RBlow,FoxP3+ FoxP3+,CD28- 作用机制 通过细胞因子,产生IL-10 通过细胞因子,产生TGFβ 接触抑制;通过细胞因子,产生IFN-γ,IL-6,IL-10 靶细胞 T effector cells 未知 APC & T effector cells 体内作用 粘膜免疫,自身免疫 粘膜免疫,自身免疫 抑制自身反应性T细胞 体外扩增 CD3,IL-10,Vitamin D CD3,TGFβ GM-CSF刺激,及IL-10 自然调节 自然杀伤 n Tregs NK Tregs 表型 CD4+,CD25+ CD4+,CD8+,CD4,CD8- 标志物 FoxP3, LAG-3, neuropilin-1 CD4-, CD8- 作用机制 接触抑制;Granzyme B依赖,产生TGFβ 识别CD1抗原和糖链;产生细胞因子 靶细胞 APC & T effector cells APC 体内作用 抑制自身反应性T细胞 自身免疫 体外扩增 TCR/CD28共刺激及IL-2 IL2、IL15共刺激 (表格部分内容参考:公众号干细胞者说)   Treg细胞从功能角度区分有五种作用机制。   细胞因子抑制:Treg细胞分泌抑制性细胞因子(如IL10、IL4等);   细胞溶解抑制:Treg细胞通过颗粒酶和穿孔素杀死效应细胞;   代谢破坏抑制:Treg细胞与效应T细胞竞争消耗IL-2,降低靶细胞对IL-2的反应性从而抑制效应T细胞增殖;Treg细胞产生胞外酶CD39和CD73促进肿瘤微环境(TME)中腺苷的产生起到增殖作用。   Tregs通过刺激性和抑制性受体(CTLA-4 或 LAG3)诱导DC耐受,后者通过IDO进一步抑制T细胞的能力。   MDSCs和Tregs 产生的因子形成正反馈环,促进增殖,增强抑制环境。    图片来源:Regulatory T cells :mechanisms of differentiation and function   三、Treg细胞的应用   已知Treg细胞数量过低或功能减弱会引起免疫系统反应过激,从而可能导致自身免疫性疾病的发生;而数量过高或异常激活会抑制免疫反应,则可能会引起肿瘤的发生。因此,Treg细胞可谓是体内免疫系统的一把“双刃剑”,可在肿瘤免疫、自身免疫性疾病、器官移植和移植物抗宿主病等方面应用。   作为肿瘤研究的热议靶点之一的Treg细胞,在肿瘤免疫过程中,Treg细胞通过表达抑制因子(CTLA4、分泌IL-10和TGF-β)来抑制过度的免疫反应,也可能促进肿瘤细胞免疫逃逸。同时,Treg 细胞也可通过趋化因子向肿瘤微环境(TME)不断浸润,参与抑制抗肿瘤免疫反应。   图片来源:Hyperprogressive disease during PD-1/PD-L1 blockade inpatients with non-small-cell lung cancer   除了肿瘤免疫治疗,针对Treg细胞进行自身免疫性疾病研究也具有重要的临床意义。自身免疫性疾病指机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害所引起的疾病,作为负责调控免疫系统停止的Treg细胞,当其功能出现异常现象时,就会造成炎症的自身免疫性疾病。目前常见的自身免疫性疾病包括1型糖尿病、炎症性肠病、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮和多发性硬化症等疾病;除此以外,在某些恶性疾病如肺、胰腺和乳腺癌等已经发现Treg细胞明显增高。   因此,对Treg细胞进行检测在评估免疫系统功能和疾病状态具有重要意义,未来Treg细胞免疫治疗行业也将得到快速发展!   IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为遗传毒性研究提供便捷产品。此外,IPHASE/汇智和源可提供特殊产品的定制服务,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。   发    文    章    得     奖    励   凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES/汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品:   非SCI论文及IF≤5分,500元礼品;   5分<IF≤8分 800元;   8分<IF≤10分 1000元;   IF≥10分 2000元;   注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券;   活动多多,礼品丰厚,快来参与吧!   关    于    我    们   汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
抗体药物作用机制——补体依赖的细胞毒性作用(CDC效应) 2024-01-26
目前,抗体类药物已成为肿瘤免疫或自身免疫性疾病治疗的热门研究方向,不同单抗应对肿瘤的作用机制也不尽相同。常见的抗肿瘤作用机制包括中和/阻断肿瘤特异性生长因子受体或免疫调节因子,以及发挥抗体结构上的效应功能即利用补体和细胞介导肿瘤细胞溶解。 一、CDC效应的概念 抗体的结构决定了其作用机制,抗体由Fab端和Fc端组成。其中Fab端可通过识别游离的分子(如VEGF)和细胞表面分子(如CD20,CD19)执行其功能);而Fc端则决定了抗体的效应功能,比如今天所要介绍的补体依赖性细胞毒性作用(Complement dependent cytotoxicity; CDC)。 补体系统是重要的免疫调节系统,补体及其补体系统是由多种血清蛋白组成的级联酶促反应,其家族成员超过40种蛋白质,且这些蛋白相互调控补体系统的三条重要途径为经典途径(Classical Pathway,CP)、凝集素途径(Lectin Pathway,LP)和替代途径(Alternative Pathway,AP)。补体依赖的细胞毒性,指的是补体参与的细胞毒作用,即通过特异性抗体与细胞膜表面相应抗原结合,形成复合物而激活补体经典途径,所形成的攻膜复合物(MAC)对靶细胞发挥裂解效应。 补体经典途径由C1q分子起始。当抗体如IgG的Fab端与靶细胞上的抗原相结合后,IgG的Fc区域发生相互作用、联结,进一步暴露出C1q的位点。C1q是补体系统的第一个蛋白,它可以识别并结合到抗体上的补体结合位点,从而发生构型改变,随后激活C1r和基于Ca2+存在下具有酶活性的C1s。C1r和C1s开始引发一系列的级联反应,并涉及到C4,C2,C3,C5,C6,C7,C8和C9等补体家族成员。随后,C5b、C6-C9再组装成MAC并在细胞膜上凿孔,最终引起细胞裂解。 图片来源:Complement System: a Neglected Pathway in Immunotherapy. 二、影响CDC作用的因素及检测方法 目前已知的影响CDC效应的因素为5点。 抗体亚型:通常,CDC效应强弱(或活化C1q能力高低)的抗体亚型比较为:IgM>IgG3>IgG1>IgG2。IgG4不具备激活补体经典途径的能力,但是凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。 靶细胞抗原的表达水平:靶细胞表面的抗原需足够多才可激活补体,若抗原表达水平较低时,补体不被激活。 补体调节蛋白:靶细胞表面或内部及血清中存在的部分蛋白可以调节补体的活性,进而影响CDC效应。 补体来源:通常选用人源或SPF级空白食蟹猴血清作为试验中补体的来源,鼠源血清对细胞有毒害作用但没有CDC效应。(来自食蟹猴的未灭活血清可用于表达靶抗原的人类靶细胞的CDC检测。) 抗原-抗体结合方位:抗原-抗体的结合方位及相邻抗体的排列方式会显著影响CDC效应。 图片来源:Complement System: a Neglected Pathway in Immunotherapy. CDC检测的流程通常为将靶细胞、待测抗体和作为补体来源的血清于37℃下共同孵育1-24小时,即可检查裂解后的死细胞或活细胞。目前常用的检测方法为:荧光染料(如PI)标记死细胞,台盼蓝标记死细胞,calcein-AM标记活细胞,Alamar blue标记活细胞,CCK-8检测细胞活力,51Cr释放实验等。 三、IPHASE相关产品 IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,可提供人源或SPF级空白食蟹猴血清,助力客户开发具有CDC效应的抗体药物,从而治疗肿瘤或自身免疫性疾病。 产品名称 规格 保存方式 空白人血清 50/100 ml 冷冻 空白食蟹猴血清 50/100 ml 冷冻 合规性 IPHASE所提供的空白人/食蟹猴血清均来源清晰,合法合规。 安全性 IPHASE提供产品的捐献者/食蟹猴均为健康供体,经过病毒或传染源检测。 专业性 IPHASE提供的产品,均由专业人员操作执行,每个批次的产品均提供相应COA,且全程冷链运输,安全、快速保证产品质量。 服务好 高质量的售后服务,确保试验一路绿灯。 可定制 可根据客户的特殊需求“专人专供”。 IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得     奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES/汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
PBMC在免疫治疗药物研发中的应用 2024-01-19
随着生物技术的飞速发展,人体免疫系统在疾病发生、发展中的作用越来越重要。外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cells,PBMC)作为免疫系统的重要组成部分,其在药物研发中的应用也日益广泛。 一、外周血单个核细胞简介 外周血单个核细胞是外周血中具有单个核的细胞的混合群体,主要包括淋巴细胞(T细胞、B细胞和NK细胞等)、单核细胞和树突状细胞。PBMC通过血液循环分布到全身各组织器官中,参与免疫应答和免疫调节。 二、PBMC在免疫治疗药物研发中的应用 PBMC可以模拟体内环境,为药物研发提供有效的体外模型。通过观察药物对PBMC增殖、凋亡和细胞毒性的影响,可以初步评估药物的疗效和安全性。通过研究药物对PBMC的作用靶点和信号转导通路的影响,有助于发现新的药物作用靶点,这些发现可以为药物研发提供新的思路和方向。 图片来源:Hallmarks of response, resistance, and toxicity to immune checkpoint blockade. Cell,2021 Oct 14;184(21):5309-5337. PBMC在免疫治疗药物研发中的主要应用方向包括:  抗体依赖细胞介导的细胞毒性(Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC) PBMC在ADCC中发挥着关键作用,PBMC中的NK细胞和巨噬细胞等是ADCC作用中的主要效应细胞。这些细胞通过与抗体结合,能够杀伤被抗体包被的靶细胞。 图片来源:ADCC enhancement: A conundrum or a boon to mAb therapy? Biologicals. 2022 Sep:79:10-18.  混合淋巴细胞反应(Mixed lymphocyte reaction)  原代DC细胞和T细胞共培养的系统,该系统可被用来评估DC介导的T细胞活化。DC细胞表面大量表达PD-L1,可与T细胞表面的PD-1结合起抑制作用,若药物能有效阻断两者的反应通路,就能大量刺激T细胞增殖,从而验证药物功能活性。  T细胞激活实验(T cell activation assays) T细胞激活实验是评估免疫疗法药物效果的常用实验之一,在T细胞激活实验中,通常采用体外培养的T细胞,并给予适当的刺激,如抗原或抗体,以诱导T细胞的活化。 图片来源:Reversing T-cell Dysfunction and Exhaustion in Cancer. Clin Cancer Res,2016 Apr 15;22(8):1856-64.  T细胞增殖实验(T cell proliferation assay) T细胞增殖实验可用于筛选免疫疗法药物候选物,并通过比较不同药物处理组与对照组的T细胞增殖程度,评估药物的有效性。  葡萄球菌肠毒素B刺激PBMCs实验(Staphylococcal enterotoxin B stimulation of PBMCs) 葡萄球菌肠毒素B是一种超抗原可直接与抗原提呈细胞上的MHC分子结合,提呈给T细胞受体,具有非特异激活T细胞的能力,诱导促炎细胞因子的释放,例如 IL-2、IL-6等。 三、IPHASE相关产品 IPHASE/汇智和源作为体外研究生物试剂的引领者,通过不断优化PBMC的提取工艺,为药物开发和免疫学研究等领域提供了高质量的PBMC,根据不同种属可分为人PBMC、猴PBMC、犬PBMC、大鼠PBMC、小鼠PBMC、猫PBMC、小型猪PBMC、兔PBMC等(详见表1)。并且,根据客户的使用要求和习惯,我们可提供新鲜分离和液氮冻存两种形式的PBMC产品,客户可根据实际需求和产品自身特性选择并订购满足要求的产品。 产品名称 规格 人PBMC 5million、10million、50million 猴PBMC 5million、20million 比格犬PBMC 5million SD大鼠PBMC 5million、20million 小鼠PBMC 5million 猪PBMC 5million 新西兰兔PBMC 5million 猫PBMC 5million 豚鼠PBMC 5million 表1 IPHASE不同种属、规格的PBMC 同时,鉴于PBMC在免疫药物的研发、生产和应用中发挥的重要作用,IPHASE可提供经ADCC和MLR等相关检测方法(如表2)验证过的PBMC,并且PBMC均经过HLA分型鉴定,可定制提供特定分型的PBMC(如表3),为药物研发提供更有针对性的免疫细胞,在最大程度上为客户节省时间和成本! 测试项目 检测指标 ADCC LDH MLR IFN-γ(MAX) MLR IL-2 细胞因子释放 IL-17A 细胞因子释放 IL-4 细胞因子释放 IL-6 细胞因子释放 IL-10 TDCC LDH 表2 测试项目 产品 规格 保存形式 HLA-A01:01,11:01 10 million 冻存 HLA-A02:01,24:02 10 million 冻存 HLA-A02:06,23:01 10 million 冻存 HLA-A02:07,24:02 10 million 冻存 HLA-A02:07,33:03 10 million 冻存 HLA-A24:02,33:03 10 million 冻存 表3 不同分型的PBMC   产品优势 合规性 IPHASE/汇智和源生产PBMC所用血液均由正规生产商采集,进口人PBMC产品均有伦理和知情,来源清晰可溯源; 安全性 IPHASE/汇智和源PBMC生产所用动物均经过传染源检测,使用更安全、更放心; 高质量 IPHASE公司建立了完善的质量保证体系,确保从细胞采集、分离、培养到产品发货的每一个环节都经过严格的质量控制。这不仅保证了细胞的品质和实验效果,也为客户提供了可靠的售后保障。 细胞组分清晰 IPHASE提供的多种属PBMC均经过流式细胞仪利用特定抗体对T细胞和B细胞内细胞组分进行占比评估,方便客户直观地了解常见细胞占比。 专业性 IPHASE公司建立了完善的质量保证体系,产品均由专业人员操作执行,每个批次的产品均提供相应的COA,且全程冷链运输,安全、快速保证产品质量。 可定制 IPHASE可根据客户的需求提供个性化定制服务。 IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得     奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于汇智和源/IPHASE所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
功能最强大的专职抗原呈递细胞——DC细胞 2024-01-11
树突状细胞是机体功能最强的专职抗原递呈细胞(Antigen presenting cells, APC),它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原,未成熟DC细胞具有较强的迁移能力,成熟DC细胞能有效激活初始T细胞,处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。 一、DC的简介 树突状细胞( dendritic cell,DC)因其表面具有星状多形性或树枝状突起而得名,通常少量分布于与外界接触的皮肤(黏膜)部位,主要在皮肤、鼻腔、肺、胃与肠的内层,血液中也可发现其未成熟形式,不同位置其称谓有所不同。目前DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志,主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。 人树突状细胞起源于骨髓造血干细胞,多数的DC细胞均由此分化而成。骨髓造血干细胞会产生巨噬细胞和DC前体(MDP),随后分化为常见的DC前体(CDP),之后CDP进一步分化为存在于外周淋巴组织中的经典型DC前体细胞(pre-cDC)和存在于骨髓中的浆细胞样前体细胞(pre-pDC)。最终,分化为成熟的经典型树突状细胞(cDC)和浆细胞样树突状细胞(pDC)。其中,经典型cDC包含经典1型DC细胞(cDC1)和经典2型DC细胞(cDC2)。 此外,还有一些较为特殊的DC细胞,包括由单核细胞经某些因子刺激分化而成的DC细胞(MO-DC)、位于分层鳞状上皮区域(尤其是皮肤)的免疫DC细胞(Langerhans,LC)和由pre-DC分化而成的DC细胞(AXL+Siglec6+,AS DC)。这些树突状细胞,均在免疫系统中承担着不同的工作职责,并对应不同的分子标志物。 标志物 功能 经典型 cDC1 CD141,CLEC9A,CD8A,ITGAE,ITGAX和XCR1 识别病原体,触发CD8A, ITGAE,ITGAX和XCR1 经典型 cDC2 CD1c,CD207,ITGAM,NOTCH2和SIRPA 通过MHC II类抗原呈递以及共刺激活化Naive CD4+ T细胞 pDC CD123,CLEC4C,LILRB4,NRP1,CCR7 识别病毒和肿瘤细胞,并激活CD8 T细胞 MO-DC CD14,CD206,CD209,SIRPA,ITGAM(CD11b)和CD1A 炎症期募集 LC CD1A,CD207(Langerin)和ID2 吸收外来抗原,将抗原呈递给T细胞 AS DC AXL和Siglec6 强烈刺激淋巴组织中的T细胞 二、DC细胞与抗肿瘤免疫的关系 DC细胞与肿瘤的发生、发展有着密切关系,大多数肿瘤组织中均存在DC亚群。虽然DC细胞数量较少,不足外周血单个核细胞的1%,但其表面具有丰富的抗原递呈分子(MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ)、共刺激因子(CD80/B7-1、CD86/B7-2、CD40、CD40L等)和粘附因子(ICAM-1、ICAM-2、ICAM-3、LFA-1、LFA-3等),是功能强大的专职抗原递呈细胞,并可诱导特异性的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)生成,而有效的抗肿瘤免疫反应的核心是产生以CD8+ T细胞为主体的细胞免疫应答,这也是DC细胞作为免疫治疗手段的关键。近年来研究表明,应用肿瘤相关抗原或抗原多肽体外冲击致敏DC细胞,回输或免疫接种于载瘤宿主,可诱发特异性CTL的抗肿瘤免疫反应。 在肿瘤免疫中,DC不能直接杀伤肿瘤细胞,但能通过识别肿瘤细胞特异性抗原,将其信号呈递给具杀伤效应的T细胞来达到监测、杀灭肿瘤的功能。通常包含两种治疗方法: 三、IPHASE相关产品 因此,DC细胞作为唯一能激活未致敏的初始型T细胞的、功能最强大的专职抗原递呈细胞,对其进行体外诱导扩增具有重要意义! 鉴于此,IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,凭借先进的设备、专业的技术人员和多年的研发经验,成功从人新鲜的PBMC悬液中分离出人CD14+单核细胞,并在GM-CSF和IL-4的共刺激培养诱导下,成功得到高诱导率、高活性的人树突状细胞! 产品名称 规格 DC细胞 1 million DC细胞 5 million 高诱导率 IPHASE专业人员将经体外诱导得到的DC细胞经CD14+、CD80+、CD83+、CD86+和HLA-DR+等5种流式抗体检测,得到较高的诱导率。 高活性 体外诱导后的人树突状细胞复苏活率可达85%以上。 便捷性 客户可直接购买使用,减少了试验的周期和难度。 专业性 IPHASE提供的产品,均由专业人员操作执行,每个批次的产品均提供相应COA。 服务好 高质量的售后服务,确保试验一路绿灯。 IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为遗传毒性研究提供便捷产品。此外,IPHASE/汇智和源可提供特殊产品的定制服务,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 发    文    章    得     奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于汇智和源/IPHASE所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧! 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
IPHASE/汇智和源 人CD14+单核细胞无痕分选试剂盒研发成功 2024-01-04
IPHASE/汇智和源 人CD14+单核细胞无痕分选试剂盒研发成功   单核细胞(Monocytes)来源于骨髓中的造血干细胞,是体积最大的白细胞,也是巨噬细胞和树突状细胞的前体,更是机体防御系统的一个重要组成部分。单核细胞参与免疫系统反应,可将吞噬后的抗原决定簇转交给淋巴细胞来诱导淋巴细胞的特异性免疫性反应;同时,单核细胞也是负责消除致病细菌和寄生虫的主要细胞防卫系统,还具有识别和杀伤肿瘤细胞的能力。因此,在免疫学、细胞和基因疗法等领域中研究单核细胞至关重要。   因此,分离可作为单核细胞标志的CD14+细胞对于免疫治疗等领域的研究具有重要意义!   一、人CD14+单核细胞   CD14(Cluster of differentiation 14)原称MY23抗原,是一种白细胞分化表面抗原,属细胞表面糖蛋白家族成员之一,其编码的蛋白优先表达于单核细胞内。CD14作为革兰阴性菌内毒素脂多糖(LPS)和LPS结合蛋白(LBP)复合物的高亲和力受体,通过识别并结合LPS,引起细胞酪氨酸磷酸化、核因子NF-κB转位、触发细胞因子释放和氧自由基产生等过程,在机体免疫、防御系统等一系列过程中发挥着重要作用。   CD14以两种形式存在,一种是细胞膜CD14,通过糖基磷脂酰肌醇尾部(mCD14)固定在膜上,另一种是可溶性形式(sCD14),前者较后者多一个PI结构。且由于mCD14主要分布在单核细胞,巨噬细胞和树突细胞的细胞表面,故CD14(mCD14)可作为辨别单核细胞或巨噬细胞的一个有用标志。   mCD14 sCD14 分子量 55 KDa 48 KDa 组织 分布 单核细胞、巨噬细胞、树突细胞和少量中性粒细胞表面 正常人和动物的血浆、血清和尿液中 配体 LPS/LBP复合体、肽多糖、磷壁酸、脂肽和多种其他微生物信号等 革兰阳性菌细胞壁成分肽聚糖、分枝杆菌上的脂肪阿拉伯甘露糖等多种病原体 功能 分泌TNF、IL-1等细胞因子;产生FGF、TGF-β、PDGF等生长因子;是信号识别分子 介导内皮细胞和平滑肌细胞对LPS的应答;对LPS的应答具有双向作用 简而言之,CD14(包括mCD14和sCD14)的化学结构为糖蛋白,其生物学功能主要是识别、结合LPS或LPS/LBP复合物,介导LPS所致的细胞反应,在LPS性炎症反应、内毒素休克等病理反应中起重要作用。若能够完全封闭CD14的功能,特异性的阻断CD14与LPS及LPS/LBP复合物结合,就能够防止或中止LPS性炎症反应、内毒素休克等病理反应的发生,对于临床治疗内毒素血症、内毒素休克等将会有重要意义。因此,对CD14+单核细胞进行分离研究至关重要!   二、IPHASE人CD14+单核细胞分选产品   IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,凭借先进的设备、专业的技术人员和多年的研发经验,先后开发出了人CD14+单核细胞阳选试剂盒和人CD14+单核细胞无痕分选试剂盒,助力客户免疫学等相关研究! 产品名称 规格 人CD14+单核细胞无痕分选试剂盒 10/20/200 Test 人CD14+单核细胞阳选试剂盒 10/20/200 Test IPHASE人CD14+单核细胞无痕分选试剂盒,采用免疫磁珠阳选的方法,利用特异性CD14生物素化适配体与人PBMC(外周血单个核细胞)或人CBMC(脐带血单个核细胞)中CD14+单核细胞结合,再与磁性微粒孵育后,在外加磁场的作用下,使得目的细胞滞留在磁场中,从而达到CD14+单核细胞被分离的目的。之后使用洗脱缓冲液,细胞与磁珠解离,并且洗脱下来的细胞表面不带有任何其他标记,以此达到无痕分选的目的。该试剂盒兼具阳选、阴选试剂盒的特点,在保障细胞纯度的基础上进一步去除了抗体-磁珠对细胞的影响,具有不可替代的优势! 高纯度 人CD14+单核细胞无痕分选试剂盒分选纯度可达90%以上。   IPHASE人CD14+单核细胞无痕分选试剂盒是从新鲜提取的人PBMC细胞中分选出单核细胞,以CD14为标志物进行流式抗体染色,并通过流式细胞仪评估细胞纯度。结果表明,人CD14+单核细胞无痕分选试剂盒显示出良好的分选效果,分选后人的CD14+单核细胞的纯度高达95.4%! 高活性 分选后人CD14+单核细胞存活率可达85%以上。   便捷性 操作简单、流程清晰,无需复杂的仪器设备,方便客户使用。   专业性 IPHASE提供的产品,均由专业人员操作执行,每个批次的产品均提供相应COA。   服务好 提供高质量的售后服务。   除了人CD14+单核细胞外,IPHASE现有不同种属的CD14+单核细胞分选试剂盒供客户选择。   产品名称 产品规格 猴CD14+单核细胞阳选试剂盒 10/20/200 Test 人单核细胞分选试剂盒 10/20/200 Test 小鼠CD14+ 单核细胞阳选试剂盒 10/20/200 Test 小鼠单核细胞分选试剂盒 10/20/200 Test IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为遗传毒性研究提供便捷产品。此外,IPHASE/汇智和源可提供特殊商品定制及批量采购等专业化需求支持服务,欢迎广大科研工作者拨打400-127-6686咨询。 发    文    章    得     奖    励 凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于汇智和源/IPHASE所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品: 非SCI论文及IF≤5分,500元礼品; 5分<IF≤8分 800元; 8分<IF≤10分 1000元; IF≥10分 2000元; 注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券; 活动多多,礼品丰厚,快来参与吧!   关    于    我    们   汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
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