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生命科学
酶联免疫吸附测定
流式细胞术
细胞分选
细胞培养
酶联免疫吸附测定

酶联免疫吸附测定 (ELISA) 是一种广泛应用于生物学和医学科学的免疫酶技术,用于定量测定各种生物基质样品中的抗体、抗原、糖蛋白、糖脂等分子。ELISA检测法依赖于抗原-抗体相互作用,结合酶/底物的催化作用,可以特异性识别复杂生物基质中目标分子。目前主要有4种形式的 ELISA 方法,包括直接 ELISA检测法、间接 ELSIA检测法、夹心 ELISA检测法和竞争性 ELSIA检测法。无论采用哪种形式,重要的是选择合适的固定抗原或捕获检测抗体对,以确保方法的特异性和灵敏度。

流式细胞术

流式细胞技术 (FCM) 是利用流式细胞仪将单个细胞传送通过光测量点,经不同波长的散射光,检测到具有荧光标记抗体(和细胞表面抗原组合)的细胞,并在细胞图上记录出来。 FCM 的优势是在于可以在短时间内(几十秒到几分钟)测量大量单个细胞,从而可以揭示细胞群的异质性,并且可以识别、量化和分类不同的细胞亚群以供进一步研究。 FCM越来越多地应用于细胞周期、细胞生理学、免疫表型等研究领域。

细胞分选

磁性细胞分选技术是利用磁性粒子偶联识别细胞表面抗原的高特异性抗体分离特定亚群的活细胞。基于磁场的磁性选择和抗体-抗原的相互作用,将目标细胞从血液或组织中分离出来。该技术被广泛用于从人和动物组织或血液样本中分离全T细胞、CD4+T细胞、单核细胞、B细胞、干细胞、NK细胞、树突细胞、内皮细胞、肿瘤细胞、白细胞、粒细胞等。特定的细胞亚群从磁珠中释放出来,几乎不受任何损伤,可直接用于细胞培养、流式细胞术和基于细胞的检测等下游应用。

细胞培养

细胞培养技术使得在实验室内体外模拟细胞分化和代谢功能成为可能。

原代细胞是从人类或动物供体组织中直接分离出来的细胞,已高度分化且接近起源组织,但通常不具有增殖性。而永生化的细胞系是从肿瘤或组织中分离出来的、可在体外培养并稳定增殖的细胞,但通常在遗传学和表型上与其起源细胞存在较大的差异。

就培养方法而言,多数源自组织的细胞,比如胚胎 (hESCs) 和间充质干细胞、纤维细胞或肝细胞,需要在细胞培养瓶或多孔板或滚瓶的表面贴壁生长。贴壁培养的细胞增殖受到培养容器的可用表面积的限制。血液细胞系或经驯化后的一些组织细胞也可在摇瓶中悬浮生长。经改造的工程细胞系可悬浮培养于生物反应器中,用于大规模生产生物类药品。

应用科学
药物筛选
遗传毒性研究
生物分析
室间质评与能力验证
药物筛选

新药开发过程通常包括临床前研究、临床试验、报批和生产上市4个阶段。药物代谢研究在新药开发的前两个阶段具有重要的指导意义,尤其是在代谢信息不明确的开发早期。

通过利用各种体外代谢模型对候选化合物的代谢特性(如代谢稳定性、代谢产物生成、代谢表型、酶抑制IC50等)进行高通量筛选,可以对代谢过快或生成毒性代谢物的候选化合物进行结构改良,或通过合成活性代谢物或模拟活性代谢物的结构得到新的候选化合物。

与体内代谢研究相比,体外代谢研究可在新药研发早期利用候选化合物的体外代谢参数合理预测候选化合物的体内药动学行为,指导后期药效、药动以及安全性评价的模型选择,缩小体内研究的筛选范围。

遗传毒性研究

遗传毒性研究(Genotoxicity Study)是药物非临床安全性评价的重要内容,与其他研究尤其是致癌性、生殖毒性等研究有着密切的联系,是药物进入临床试验及上市的重要环节。拟用于人体的药物,应根据受试物拟用适应症和作用特点等因素考虑进行遗传毒性试验。遗传毒性试验是指用于检测通过不同机制直接或间接诱导遗传学损伤的受试物的体外和体内试验,这些试验能检测出DNA损伤及其损伤的固定。

遗传毒性试验方法有多种,根据试验检测的遗传终点,可将检测方法分为三大类,即基因突变、染色体畸变、DNA损伤;具体的试验内容包括细菌回复突变试验(Ames试验),体外染色体畸变试验,体外微核试验,体外小鼠淋巴瘤L5178Y细胞TK基因突变试验,HGPRT基因突变试验,彗星试验等。

IPHASE品牌针对遗传毒性各项试验,分别开发出遗传毒性Ames试剂盒,体外染色体畸变试剂盒,体外微核试验试剂盒,TK染色体畸变试剂盒,HGPRT基因突变试剂盒,彗星试验试剂盒等,大大提高各个遗传毒性试验的完成效率,省去试验试剂配制准备验证等各个环节,大大缩短实验人员实验时间。

生物分析

质谱检测中,不可避免的会遇到基质效应,为了验证基质带来的影响,需要使用空白基质,若分析物为外源性物质(大多数药物,环污染物等)都可以使用正常人或动物的生物样品(血浆,血浆,尿液,胆汁等)作为正常的BLANK,单如果分析物为内源性物质(正常人或动物体内本身含有的皮质醇,胆红素,维生素等),就很难获得空白基质,这种情况下,想要去除生物样本中的内源性物质很难完成,可以使用人工基质,模拟人体或动物体内环境配置而成,成分明确,有效解决内源性物质干扰问题。

IPHASE品牌空白生物基质产品,包括不同种属动物空白血清,血浆,尿液,胆汁,粪便,组织等空白基质,人工血浆,人工尿液,人工胃液,人工小肠液等人工基质,为创新药物研发机构生物分析研究,大分子药物生物分析,小分子药物生物分析,如方法学开发,方法学确证,药代动力学分析,毒代动力学分析等提供专业产品与专业服务。

室间质评与能力验证

室间质量评价也被称作能力验证,是国际公认的临床实验室全面质量管理的重要组成部分,也是医疗机构质量管理的重要内容。室间质量评价是为确定某个实验室进行某项特定校准或检测能力以及监控其持续能力而进行的一种实验室间的比对。

IPHASE拥有专业的综合分子检测平台,十余年分析检测经验,长期为中国疾病预防控制中心,国家食品安全风险评估中心,卫健委临床检验中心,北京市临床检验中心提供能力验证相关标准物质与质控品。

技术应用:
IPHASE/汇智和源 T淋巴细胞增殖产品—助力细胞治疗研究 2022-11-02
1    细胞免疫治疗 2012年,美国的急性淋巴细胞白血病患者艾米丽参与了CAR-T的Ⅰ期临床试验,在经历了一系列的治疗危机后,彻底清除了体内的癌细胞。并且直至2021年,艾米丽的体内依旧没有出现癌症复发。全球第一个成功治愈癌症的案例为CAR-T疗法提供了宝贵的经验,艾米丽的成功治愈,使细胞免疫疗法迅速成为全球科学家的研究热点,随后,越来越多的该疗法被批准上市,国内对于细胞免疫疗法的研究也越来越深入。 CAR-T细胞疗法的本质是分离外周血中的T细胞,之后通过基因改造,导入能够特异性识别肿瘤抗原的CAR基因,将带有特异性抗原识别结构域及T细胞激活信号的遗传物质转入T细胞,并在体外扩增,使回输的T细胞直接与肿瘤细胞表面的特异性抗原相结合而被激活。 无论CAR-T细胞治疗产品如何优化更新,T细胞的体外激活与扩增过程,都是T细胞治疗产业规模化生产的重要、必不可少的环节。 对于T淋巴细胞体外刺激增殖方向的研究,IPHASE/汇智和源推出了一系列产品以及完善的细胞增殖方案,为生命科学研究提供国内优质的前端科研产品。 2    T细胞刺激增殖试剂 IPHASE/汇智和源T细胞体外增殖产品为客户提供操作更简单、步骤更清晰的体外淋巴细胞增殖产品,主要对原材料厂家进行了细致的对比筛选验证,优化了各个操作细节,为研究学者的前期研究提供成功的保证。 表 1 IPHASE/汇智和源T细胞刺激增殖试剂 3    免疫细胞 4    IPHASE免疫细胞产品优势 细胞活率高:最大程度保证细胞的原始状态,分离后的新鲜细胞或冻存复苏后的活率均在90%以上。 细胞纯度高:分选纯化后的免疫细胞纯度高,所有细胞产品纯度均在90%以上。 产品安全性高、无传染源:IPHASE严格把控全血/组织样本来源,确保无传染源,为客户提供更安全、更放心的实验材料。 细胞来源清晰、可溯源:具备完全合规的采购流程以及全血生物安全证书,免除客户使用的后顾之忧。 5    免疫细胞分选试剂盒 此外,IPHASE/汇智和源针对免疫细胞研究还提供高效免疫磁珠分选试剂盒 表格 2 IPHASE/汇智和源免疫细胞分选产品 6    IPHASE分选试剂盒产品优势 纳米级磁珠:粒径小; 活率高:分选后细胞活率均在90%以上,媲美进口龙头产品; 纯度高:分选后靶细胞纯度可达90%~98%; 高效:省时省力,5分钟磁性分离出靶细胞; 操作简单:实验小白也能快速得到目的细胞; 得率高:分选得率均在90%以上,最大程度富集靶细胞,供后续研究使用。 IPHASE致力于提供高品质的生物试剂产品,助力科研之路。 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
新品推荐 | 替代生物基质新秀——人工全血 2022-10-26
1    血液、全血和人工全血 血液是流动在人的血管和心脏中的一种红色不透明的黏稠液体。血液由血浆和血细胞组成,具有运输、调节机体温度、防御、调节渗透压和维持酸碱平衡等功能。 全血是将机体内血液采集到采血袋内所形成的混合物,主要包括血细胞和血浆。 人工全血,顾名思义,即人造全血,是人为的将血液中的主要成分进行组合而成的混合物,最大限度的反应了全血的特性。 2    IPHASE人工全血 全血主要由血浆和血细胞组成,内源性物质主要存在于血浆中,在血细胞中含量却相对较少,基于这一特点,IPHASE/汇智和源通过反复离心,洗涤的方法,得到了较为纯净的血细胞,并将血细胞与人工血浆按照一定比例组合,最终形成了较为成熟的人工全血产品,并在多个领域得到了应用。 无干扰:制备工艺成熟,有效去除了内源性物质干扰。  高相似度:保留了全血中血细胞组分,组分更接近真实全血。 可溯源:可提供质控报告,满足溯源性要求。  可量产:成分清晰,可满足大批量订购需求。 可定制:可根据实际需求,定制特定种属人工全血产品。 3    人工全血的应用 3.1 生物样品分析 在创新药物研发过程中,生物基质(如血清、血浆、血液、尿液、唾液等)中药物浓度测定是一个重要的方面,其数据可用于支持新活性物的应用和仿制药及已授权药物的变更申请。但是,当待测物为内源性物质时,如果分析方法不能区分药物部分和相应的内源性部分,则会影响到待测物测定的准确度。此时,若无法获得无干扰的真实生物基质,替代基质(简化基质、人造基质或经净化的基质)即为不错的选择。 IPHASE/汇智和源人工全血以全血为基础,不但最大限度的模拟了真实全血的细胞组成,而且还去除了真实全血中内源性物质的干扰,是市面上与全血最接近的替代基质。若需进行全血中内源性物质的检测,IPHASE/汇智和源人工全血将是最优选择。 3.2 基质标准物质/质控品的制备 标准物质是一种已经确定了具有一个或多个足够均匀的特性值的物质或材料,是分析测量行业中的“标尺”,在校准测量仪器和装置、评价测量分析方法、测量物质或材料特性值、考核分析人员操作技术水平、生产过程质量控制等领域起着不可或缺的作用。质控品是实验室自己制备,供自己内部使用,用于评价分析方法稳定性、考核分析人员操作水平、实验室质量控制等的物质。  然而,如需制备基质标准物质/质控品,合格的基质选择是其关键步骤,尤其是需制备内源性物质干扰较严重的基质标准物质/质控品时,选择高质量的人工基质将会是一个新的思路。制备全血基质标准物资/质控品,IPHASE/汇智和源人工全血即为大家提供了一个很好的解决方案。 4    IPHASE替代生物基质产品 凭借先进的设备、专业的技术人员和多年研发的经验,IPHASE/汇智和源开发出了多种类型的替代生物基质产品,且可提供特殊替代生物基质的定制服务。 IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品。此外,IPHASE/汇智和源可提供特殊产品的定制服务,欢迎广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
PBMC产品库新品推介—羊驼/骆驼外周血单个核细胞 2022-10-19
1    羊驼的研究价值 羊驼(Vicugna)为偶蹄目、骆驼科的动物。羊驼性情温顺,伶俐而通人性,除野生种外,还有相当数量的驯良种。世界上现有约300万只。1993年比利时布鲁赛尔自由大学免疫学家Hamers-Casterman教授等人研究证实在骆驼(骆驼科,包括单峰骆驼和羊驼)的血清中存在一种与传统抗体结构不同的新型抗体,即仅有两条重链组成的特殊抗体--重链抗体,可通过重链上的一个可变区识别抗原,这个可变区可以单独稳定的在体外存在,且具有完整的抗原识别能力,其分子量只有15kD左右,是传统抗体分子量的1/10,被称为驼类单域抗体或纳米抗体。驼类单域抗体的优点有分子小、稳定性高、免疫原性低、易于人源化、易于连接以及多种给药途径等,这一系列优势在新药研发方面具有极大的潜力,受到研究学者的广泛关注。以上种种羊驼/骆驼的特征都暗示着,该物种作为一种疾病研究模型的重大应用价值。 2    羊驼/骆驼PBMC产品介绍 IPHASE/汇智和源为满足国内外市场关于骆驼种属的研究,基于企业自身产品研发基础以及专业的研发人员,开发出高质量的羊驼/骆驼外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC)提取、纯化的方法。 该方法的原理主要是根据骆驼属单个核细胞的体积、形态和比重与外周血内其它细胞不同。因此,可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各种血细胞与单个核细胞分离开来。IPHASE/汇智和源成熟的动物PBMC分离技术,保证细胞分离过程中不受损害、不被刺激,后期的纯化技术保证骆驼单个核细胞的纯度以及活率等技术指标,适用于后期的细胞培养、抗体制备等其他研究。 3    羊驼/骆驼PBMC产品优势 l细胞活率高 IPHASE科研人员严谨的态度以及深厚的产品研发经验是骆驼PBMC产品质量的保障,实验所使用的分离试剂无菌、低内毒素,对细胞无伤害刺激,操作人员具备多年PBMC细胞分离经验,最大程度保证细胞的原始状态,分离后的新鲜细胞或冻存复苏后的活率可达90%以上。 l 细胞纯度高 IPHASE独有的细胞纯化技术,能够很大程度去除其他成分,保障羊驼/骆驼PBMC细胞的高纯度,降低其他成分对实验的干扰。 l 产品安全性高、无传染源 IPHASE严格把控羊驼/骆驼全血来源,保证实验骆驼均经过相关传染源检测,为客户提供更安全、更放心的实验材料。 l 细胞来源清晰、可溯源 IPHASE/汇智和源分离羊驼/骆驼使用的全血均由正规动物中心提供采集,具备完全合规的采购流程以及全血生物安全证书,免除客户使用的后顾之忧。 4    PBMC产品库 外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC)一直是免疫学以及临床医学等领域研究的重要样本类型,国内外研究学者会对其进行很多实验验证,如免疫细胞分选以及细胞培养等。IPHASE/汇智和源通过对不同种属动物的外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC)进行系统而详细的研究,形成了稳定而强大的PBMC产品库,主要有人、猴、大鼠、小鼠、犬、兔、猪等种属。 5    PBMC产品库部分产品展示 此外,IPHASE/汇智和源PBMC产品库,不仅可提供新鲜以及冻存两种形式的细胞,还可根据客户需求提供大规格产品,满足客户使用需求。 IPHASE/汇智和源高质量新产品羊驼/骆驼PBMC完美解决了科研人员的使用需求,详细技术咨询:400-127-6686,或登录IPHASE官网https://www.iphasebio.com进行查询。 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
干货分享|眼科药物研究的实验动物选择 2022-09-16
“小眼睛,大世界”,眼是人类感官中最重要的器官,是采集信息的最重要的窗口。眼睛虽小,细分的疾病却很多,有些眼科疾病可能会造成失明。我国是眼科疾病的高发区,常见眼疾包括屈光不正(如近视、远视、老花眼及散光)、结膜炎、干眼症、白内障、睑缘炎、视网膜疾病、斜视、弱视、青光眼及葡萄膜炎等。其中,白内障是致盲的首要病因,在60岁以上的人群中发病率高达80%~90%;非致盲类疾病中屈光不正正逐渐成为社会日益关注的焦点问题,20岁以下人群近视率接近70%,且还在进一步增加。随着国民健康意识的提升,除了“看得见”,“看的清、看的舒服”已成为刚需,越来越多的新创企业和生物公司也加入到了眼科药的研发行列,眼科药物开发正面临前所未有的机遇。但是,眼是一个十分复杂的器官,有着特殊的生理结构和屏障系统,外源药物很难进入眼内靶组织发挥药效,这给眼科药物开发带来了挑战。 1    眼的结构 眼由眼球壁和内容物构成。眼球壁由三层组织构成,外层为纤维膜(包括眼前部透明的角膜、后部白色的巩膜及中间起连接作用的角膜缘),中层为葡萄膜(由虹膜、睫状体和脉络膜组成),内层为视网膜。眼内容物包括房水、晶状体和玻璃体,与角膜了一起构成眼的屈光系统。其中晶状体是眼内重要的透明实体组织,它位于虹膜后、玻璃体前,被晶状体悬韧带固定于睫状体之前。晶状体之前的眼结构称为眼前段,约占眼球的1/3,由角膜、结膜、虹膜、睫状体、晶状体和房水组成;晶状体之后的眼结构为眼后段,约占眼的2/3,由巩膜、脉络膜、视网膜及充满玻璃体液的玻璃体组成。 图1 眼的解剖结构(来源:百度图片) 眼还具有特殊的屏障系统,可选择性的控制内、外源性物质的通透性,具有维持眼内环境平衡的作用。眼屏障系统分为静态屏障和动态屏障。静态屏障包括:角膜屏障、血-房水屏障(BAB)、血-视网膜屏障(BRB),一般将BAB和BRB统称为血-眼屏障。动态屏障包括结膜和脉络膜的血液/淋巴液循环,泪液、房水的引流和周转等,这是局部外用药物眼内生物利用度低的重要原因之一。此外,眼组织毛细血管内皮细胞表达的外排转运体,如P-糖蛋白、多耐药蛋白、乳腺癌耐药蛋白等,对药物吸收也是一种重要屏障。 2    试验动物选择 新药开发过程中一般都要开展人体药代动力学研究,但对于眼科药物,连续从人体眼组织采集样品进行生物分析,既不符合伦理也不可行,常采用动物眼组织分布研究来外推或替代人眼药代动力学研究。兔、猴和人具有相似的眼解剖结构,是眼药代动力学研究最常采用的动物。由于兔易获得、成本低,小分子药物常采用兔开展药代动力学研究;大分子药物受免疫原性及严重炎症反应影响,常采用猴开展药代动力学研究。 由于动物和人存在种属差异,任何动物模型都不可能完全模拟药物在人体内的作用,建议采用多种模型组合验证药物的疗效。眼部用药药效学试验关键是选择合适的动物模型和药效学指标,证明药物在靶组织中达到有效的治疗浓度。动物模型应关注与人体的相关性和局限性,包括:(1)动物眼部解剖和生理结构与人的相似性和差异性;(2)与人疾病的病理生理学的相似性和差异性,包括发病机制、疾病进程和临床表现等方面;(3)药物与人和动物靶点结合和占位的差异;(4)药物在动物和人体药代动力学方面的差异,如蛋白结合率、黑色素结合率差异等。选择的药效学指标应能够较好的测定及预测药物的疗效,尽量涵盖一些临床试验不能监测的指标,如病理学指标等。 表1 眼科给药选择实验动物的优缺点比较 来源:孙云霞, 李和平, 廖琴. 眼部给药的非临床安全性评价实践与挑战[J]. 中南药学, 2018, 16(10):6. 3    IPHASE产品 IPHASE根据眼科药物研发的需求,筛选出了符合试验要求的各种空白基质,为试验的顺利进行提供了保障。 l  种类齐全,有完善的供应商体系,可覆盖各种动物种属 l  有实验动物中心,具备大小动物实验动物使用许可证,SPF级屏障环境及普通环境 l  有经验丰富的实验动物专家,可定制化采集客户所需空白基质 l  完善的质量控制系统,产品质量稳定,产量充足,溯源性好 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
IPHASE 自然杀伤(NK)细胞分选试剂盒—NK细胞治疗研究的新起点 2022-09-09
1    自然杀伤(NK)细胞优势 近年来,人类 NK 细胞因其在生物学基础研究的重要研究进展和肿瘤治疗临床应用中的的巨大潜力而备受科学界和产业界的广泛关注。  NK细胞主要来源于骨髓造血干细胞中的CD34+淋巴细胞,约占外周血淋巴细胞总数的10%~20%。NK细胞虽然来源于淋巴细胞,但是与T/B淋巴细胞不同,NK细胞属于固有免疫,不依赖MHC分子即可发挥杀伤肿瘤细胞的功能,能够杀灭发生免疫逃逸的肿瘤细胞。NK细胞杀伤靶细胞的三种机制如下: 目前对于NK细胞的研究表明,在细胞治疗的应用中与T细胞相比,NK细胞具有更多优势: (1)NK细胞的抗肿瘤谱更广; (2)NK细胞在体内存活时间短,副作用发生率低; (3)NK细胞治疗不会产生移植物抗宿主病,安全性高; (4)NK细胞获取来源更广泛,可获取数量庞大。 2    IPHASE高质量NK细胞分选试剂盒 基于NK细胞在细胞治疗领域的种种优势,IPHASE研发了富集高纯度NK细胞的免疫磁珠分选试剂盒。该试剂盒以免疫学、细胞生物学以及磁力学为基础,经过原料筛选、反应体系以及反应条件优化等研究过程,最终形成能够分选出高纯度、高得率的分选试剂盒产品。 IPHASE 自然是杀伤(NK)细胞分选试剂盒原理 IPHASE分选后NK细胞纯度与国外某知名品牌对比,纯度一致,具体数据如下图。 3    IPHASE自然杀伤(NK)细胞分选试剂盒优势 (1)分选后NK细胞纯度高,可达95%以上; (2)分选NK细胞得率高,可达90%以上; (3)分选得到的NK细胞活率高,冻存前后细胞活率均在95%左右,满足NK细胞的后续研究需求。 IPHASE的NK细胞分选试剂盒以及相关产品收到了诸多研究学者以及业内人士的好评,是国内生命科学领域研究的佼佼者,致力于提供高品质的生物试剂产品,助力科研之路。 4    IPHASE 自然杀伤(NK)细胞分选相关产品: 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
血浆在新药研发中的应用 2022-09-07
血浆是血液的重要组成部分,其主要成分是水、血浆蛋白、葡萄糖、激素、矿物离子以及多种水解酶等。在新药研发过程中,血浆除了可作为空白基质,考察分析方法的准确性和可靠性外,更重要的作用是作为试验系统,研究化合物在血浆中的稳定性和药物与血浆蛋白的结合情况,为成药性研究提供数据支持。 1    血浆在ADME研究中的应用 1.1血浆在蛋白结合研究中的应用 药物蛋白结合率的测定是新药开发过程中的一项重要工作,药物的血浆蛋白结合程度不但会影响到药物的处置特征,而且还和药物的药理作用息息相关。普遍认为,只有游离药物才能被组织摄取、被清除器官消除,并且能结合到药理作用靶点或是组织蛋白来控制其药理作用的发生,而结合的药物需先从药物-蛋白结合物中解离才能进入上述过程。 血浆中与药物结合的蛋白主要有白蛋白(Albumin,65KDa)、脂蛋白(Lipoprotein,200~3400 KDa)、a1-酸性糖蛋白(Alpha acid glucoprotein,44KDa)。血浆蛋白不但可维持血液渗透压平衡,而且还可通过特异性/非特异性结合的方式转运外源或内源性的物质。白蛋白是血浆中含量最高的蛋白,是主要的药物结合蛋白。通常,白蛋白对酸性药物具有更高的亲和力。血浆中a1-酸性糖蛋白的含量小于0.1g/L,碱性药物更倾向于与a1-酸性糖蛋白结合。脂蛋白的主要生理作用是合成及转运内源性脂肪酸,如甘油三酯、磷脂和胆固醇等,但也发现其在极端亲脂性和/或碱性药物的蛋白结合中发挥着重要作用。此外,各种特异性的蛋白也参与了血浆中某些内源性化合物(包括激素)的蛋白结合和转运。 1.2 血浆在稳定性研究中的应用 在血浆中存在着多种水解酶,如胆碱酯酶、醛缩酶、脂肪酶、脱氢肽酶、碱性和酸性磷酸酶等,倘若待研究的化合物对这些酶中的一种具有亲和力,并且在合适的位置上具有可被水解的基团,那么该化合物在血浆中就能被分解,从而影响生物测试结论的准确性或者使其在体内达不到有效的治疗浓度,故评价药物的血浆稳定性至关重要。  一些含有特定官能团的化合物在血液中易分解,这些官能团主要有酯基、酰胺、内酯、氨基甲酸酯、内酰胺、磺酰胺以及肽类结构等。而不稳定的化合物常常具有较高的清除率和较短的半衰期,从而导致体内药动学和药效学性质不佳。如果在新药研发过程中只关注化合物的肝代谢稳定性而忽视其血浆稳定性,就可能无法有效地解决化合物的体内稳定性问题。 2    影响血浆特性的主要因素 高质量的血浆供应是确保试验结果稳定、可靠的前提,血浆的特性是影响ADME研究的主要因素。 ① 动物种属差异。不同种属动物的血浆存在较大差异。 ② 性别差异。同一种属雌雄动物血浆中的蛋白浓度存在差异。 ③ 年龄差异。血浆容量及其组成随年龄而改变,不同年龄的动物其血浆容量和蛋白含量可能会存在差异,故年龄是影响血浆特性的一个重要生理因素。 ④健康状态。动物的健康状态会严重影响到血浆中蛋白的含量,如机体某些组织发生病变,可能会导致血浆中某些蛋白含量的下降。 3    IPHASE产品优势 IPHASE/汇智和源根据血浆蛋白结合试验和血浆稳定性试验的特点,筛选出了符合试验要求的专属血浆,为试验的顺利进行提供了保障。 l 多种属 本公司可提供猴、犬、大鼠、小鼠等种属不同抗凝剂的血浆,满足客户需求。 l 特定采血方式 本公司提供的血浆均通过心脏采集的血液分离而来,更适用于血浆蛋白结合试验。 l 安全性 采集血浆的动物均经过传染源的检测,使用更安全、放心。 l 溯源性 本公司血浆产品均可提供溯源性证明,为客户免除了后顾之忧。 l 质控数据齐全 本公司使用阳性药来评估血浆质量,保证了试验结果的准确性和稳定性。 表1 华法林在不同种属血浆中的蛋白结合率 表2 阳性药在血浆质量评估中的使用 l 可定制 除常规种属血浆外,本公司还可根据客户需求,提供特殊种属血浆的定制服务。 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
PBMC细胞冻存液使用方法及注意事项 2022-08-22
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。目前,细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法,利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态,并保持细胞特性。通过冷冻方式保存细胞,可以在需要时进行复苏及继续培养。 最佳的冷冻条件是尽可能地降低细胞内的晶体形成,减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤。除了我们知道的 缓慢冷冻,液氮低温保存,快速复苏外,冻存液的选择也非常重要。 1    产品简介 汇智和源无血清细胞冻存液,优化了其配方组分,能够更大程度的减少细胞在冻存、复苏时的损伤。 本品不含血清,降低了DMSO的含量,属于即用型细胞冻存液,无需配制,直接在细胞中加入适量的冻存液即可。对于PBMC细胞、干细胞或T淋巴细胞等细胞具有较好的保护能力,让你轻松拥有高活率的细胞。 2    产品优势 成分:不含血清,降低了DMSO含量 高效:长期冻存后复苏的细胞,仍然可以达到满意的复苏率 方便:即用型,无需额外配制 安全:无微生物污染风险,批次稳定 3    冻存流程 1、冻存管、梯度冻存盒放进4℃冰箱提前预冷; 2、将要进行冻存的PBMC细胞、干细胞或T淋巴细胞等细胞, 350g 离心 7 分钟,弃去上清并收集细胞。 3、加入汇智和源无血清细胞冻存液,吸管轻轻吹打,重悬细胞。计数并调整细胞浓度; 4、将细胞悬液分装于无菌冻存管中,每管加1mL细胞悬液,旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记; 5、冻存:细胞放入梯度冻存盒,先在-20℃放1-2个小时,再放入 -80℃冰箱过夜,再转入液氮罐。 4    细胞冻存的注意事项 1、缓慢冷冻,细胞逐步脱水,不会因产生大的冰晶而受到损害 2、细胞在-20C冰箱内放置时间不可超过1小时,以防止冰晶过大而破坏细胞。 3、保存在-80°C冰箱中的时间不要超过24h,放入液氮中保存; 4、冻存管的盖子一定要拧紧,否则复苏水浴时会渗水,造成支原体污染; 5、定期检查液氮储备,保证细胞全部浸在液面下。 5    相关产品 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
高效CD3/CD28刺激磁珠上线啦! 2022-08-15
目前,体外模拟T细胞活化的双信号作用,联合使用CD3和CD28抗体刺激T细胞,是进行T细胞激活和扩增最广泛的方法。针对T细胞激活与扩增,汇智和源研发团队研制以免疫学为基础以及纳米磁珠技术为核心,研制出能够高效刺激T淋巴细胞增值的免疫磁珠产品。 图1:IPHASE CD3/CD28 beads 刺激淋巴细胞原理 IPHASE CD3/CD28 beads分离刺激人淋巴细胞流程 图2:IPHASE CD3/CD28 beads 分选刺激淋巴细胞扩增流程 IPHASE CD3/CD28 beads刺激T淋巴细胞增值培养3天后,开始形成细胞簇。 IPHASE CD3/CD28 beads分离刺激人淋巴细胞增值率: 注:横坐标为刺激培养天数 由对比图可以看出,IPHASE CD3/CD28 beads 刺激培养T淋巴细胞扩增与国内某其他厂家产品相比,T淋巴细胞增值率明显高于其他厂家产品。 T细胞刺激增值其他IPHASE相关产品 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
原代肝细胞三维培养模型在药物代谢和毒性评估中的应用 2022-07-29
原代肝细胞二维(2D)培养具有操作简单、费用低等优点,是目前体外药物代谢和毒性评估广泛使用的细胞模型。由于2D培养不能模拟体内微环境和细胞生长状态,2D细胞模型在组织结构、基因表达以及生物学特性等方面与体内细胞相去甚远。三维(3D)细胞培养可提供与体内相似的支架系统,创建与体内类似的生长环境,具有与来源组织十分接近的结构特征和功能特性。肝细胞3D培养模型必将在未来药物代谢、毒性评估以及疾病细胞模型中逐步取代2D肝细胞模型。 1    3D培养简介 1.1  3D细胞培养定义 3D细胞培养是指将具有三维结构的材料与细胞在体外共同培养,使细胞能够在载体的三维立体空间结构中迁移、生长,构成三维的细胞载体复合物。3D培养类似于细胞在体内的生长方式,既能保留体内细胞微环境的物质及结构基础,又能展现细胞培养的直观性及条件可控性的优势。 1.2  3D细胞培养优势 体外模拟复杂的组织结构,接近体内细胞生长环境,实现真实的细胞生 物学功能。 准确建立靶组织模型,有效预测病程和药物反应。 少量细胞可实现快速生长,兼容自动化仪器,降低成本。 1.3  3D细胞培养方式 无支架培养:悬滴培养,磁悬浮培养,超低粘附培养面培养等。 支架培养:天然支架,合成支架。 2    原代肝细胞3D培养模型 2.1 肝细胞球聚体培养模型 肝细胞球聚体培养是通过无支架3D培养方式,接种培养的肝细胞可形成直径达100-200µm球状聚集体。肝细胞球聚体与机体肝组织在结构和功能上十分相似,都是由胶原、弹性蛋白、蛋白多糖和糖蛋白所构建的立体网络结构支持和调节,球聚体内部可出现类胆管结构,用核磁共振光谱扫描肝细胞球聚体,球聚体代谢产物谱与体内肝脏最相似,而与2D培养的肝细胞差异很大。此外,肝细胞存活时间和肝特异性功能(如细胞色素P450活性和白蛋白合成等)维持时间都比2D培养的肝细胞显著延长。 最近一项研究表明人原代肝细胞经球聚体培养后存活时间超过5周,且CYP酶活性几乎没有变化。肝细胞球聚体在蛋白质组水平上与在体肝脏非常相似,负责药物吸收、分布、代谢和排泄的酶能持续表达14天以上。2D培养的肝细胞最多存活7-10天左右,而肝细胞球聚体超长的存活时间非常适用于药物的肝毒性评估。最近报道了一种由肝细胞和非实质细胞组成的球聚体反复暴露于化学物质28天后,显示其对肝毒性的敏感性增加,这些结果表明重复暴露对检测肝毒性的重要性。 2.2 肝细胞三明治培养模型 在体外通过在两层胶原或Matrigel内培养肝细胞可以重构体内结构,称为三明治培养。三明治培养的肝细胞能广泛形成胆汁毛细管网状结构,而且可以长时间保持肝脏特异性功能,同时具转运胆汁酸和维持钠离子-牛胆酸共同转运多肽的功能。三明治培养的肝细胞代谢酶活力可维持2周左右,且无代谢退化现象。在2D培养的大鼠肝细胞中,细胞色素CYP3A仅在d1表达,而在三明治培养的肝细胞中却可表达2周左右,且表达量随着培养时间的延长而显著增加。肝细胞三明治培养的另一个主要特点是能激活需经过代谢才具遗传毒性的化合物,且该活性能维持2周左右,而2D培养的肝细胞在最初接种培养几个小时后丧失这种能力。虽然无细胞体系(如肝S9)能代谢化合物成遗传毒形式,但在代谢过程中扰乱了化合物的激活/去毒平衡,因此与完整细胞体系的代谢产物谱差异很大。三明治培养的肝细胞比肝S9表现出更真实的遗传毒效应。 3    IPHASE原代肝细胞产品 IPHASE/汇智和源凭借多年的技术能力和技术经验的积累,现已形成猴、犬、大鼠、小鼠等原代肝细胞产品,并且在已有原代肝细胞产品的基础上,聚焦研发肝细胞球聚体和三明治培养肝细胞等3D细胞模型,为广大客户提供更为合适的体外药物评价细胞模型。 4    IPHASE原代肝细胞优势 l  安全性 IPHASE/汇智和源分离原代肝细胞所用动物均经过传染源检测,使用安全、更放心。 l  纯度高 IPHASE/汇智和源生产的原代肝细胞经分离纯化后纯度高,状态好。 l  活性好 IPHASE/汇智和源生产的原代肝细胞,复苏存活率可达90%以上,所有种属原代肝细胞均经过体外代谢质控,代谢活性强。 5    相关产品 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
微量波动Ames试验试剂盒——药物早期毒性筛选的最佳选择 2022-07-25
1    微量波动Ames试验 在药物发现与早期筛选阶段,微量波动Ames试验(Ames Fluctuation Test)可以在化合物用量较少的情况下,有效筛选排除具有遗传毒性的化合物。汇智和源针对微量波动Ames试验,开发出一套包含整个实验主要试剂的试剂盒——微量波动Ames试验试剂盒,试剂盒以微型96孔板形式进行细菌突变测试,适用于早期药物遗传毒性评估,可在测试化合物有限的情况下进行预筛选。 2    IPHAES微量波动Ames试剂盒的优势 自己配试剂:菌株稳定性差!试剂多!计数烦!费时间!易污染!等货期! 微量波动Ames试验(Mini-Ames)试剂盒:全套试剂!活化菌株!定量配置!稳定准确!拿来即用! IPHAES微量波动Ames试剂盒: 一次试验 不用两周 不用一周 三天搞定 3    IPHAES微量波动Ames试剂盒组分 ① 菌株 TA98,TA100 ② S9 ③ 阳性药等 l  产品优势 ① 便捷性:省去诱导S9制备、菌株培养和鉴定、试剂配制时间,可以直接使用,大大缩短了实验周期。 ② 准确性:试剂盒各成分均经过严格的质量检测,实验结果准确、可靠、重现性高。 ③ 高效性:利用显色原理判断受试物的致突变性,大大减少计数工作。 ④ 稳定性:试剂盒稳定性强、易于运输和保存。 ⑤ 应用广:可用于食品、药品、化妆品、化学品、保健品、农药等的遗传毒性研究 l  适用范围 ① 药物遗传毒性早期筛选 ② 化学品,农药,兽药等遗传毒性早期筛选 ③ 化合物开发的早期阶段或在测试材料供应有限或用于培训目的时进行预筛选 4    相关产品 参    考    资    料: [1]OECD Guidelines for Testing of Chemicals (No.471,Adopted:21,July 1997). [2]Green M.H.L.,Muriel W.J.,Bridges B.A.. Use of a simplified fluctuation test to detect low levels of mutagens[J]. Green M.H.L.;Muriel W.J.;Bridges B.A.,1976,38(1). [3]Gatehouse D. Detection of mutagenic derivatives of cyclophosphamide and a variety of other mutagens in a "microtitre" fluctuation test, without microsomal activation.[J]. Mutation research,1978,53(3). 关    于    我    们 汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购    买    方    式 电话:400-127-6686 微信:直接扫描右侧微信二维码添加购买
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