Q:微粒体,S9,细胞浆,CYP450酶一次用不完怎么办?能冻融几次?
A:微粒体,S9,细胞浆,CYP450酶等如果一次试验用不完,可以提前预估后面每次试验的用量,第一次化冻时分装保存,化冻分装均需在冰上操作,做好记录,-80℃保存。
Q:微粒体,S9,细胞浆等供体数量对实验有什么影响?
A:参考FDA指导原则,进行药物ADME研究时,可以选择10个以上供体混合的微粒体,S9,细胞浆等进行试验。多个供体混在一起,是为了消除个体差异对于试验的影响。
Q:CYP450酶(重组酶)高活性和低活性有什么区别?如何选择?
A:高活性CYP450酶(重组酶)代谢速率较大,一般在较短时间内(如10min)代谢速率与孵育时间成线性。低活性CYP450酶(重组酶)在较长时间内(如1h)具有良好的代谢速率与孵育时间成线性。低活性的CYP450酶(重组酶)更接近体内环境。