在细胞培养与细胞治疗，尤其是MSC等干细胞培养领域，血清替代方案的升级正在加速。传统胎牛血清（FBS）因动物源属性带来的免疫原性风险、批次差异与合规障碍日益凸显，人AB血清则受法规监管，进口特殊物品审批风险评估限制流程久价格贵。人血小板裂解液（Human Platelet Lysate，HPL血替） 作为新一代无动物源细胞培养补充剂，凭借高浓度生长因子、人源化安全属性与与稳定的批次一致性，正成为科研与工业级细胞培养血清替代物的更优选择。

01    IPHASE Human Platelet Lysate
IPHASE /汇智和源全新推出的科研级人血小板裂解液（Human Platelet Lysate）产品，是直接从健康人外周血或单采血血小板中提取、分离的血小板裂解液。作为FBS及人AB血清的替代物，无动物源成分，为间充质干细胞、免疫细胞等多种人源细胞培养提供高效、安全、可重复的营养支持。

IPHASE  Human Platelet Lysate

规格：25mL，50mL，100mL，500mL
存储：≤-20℃
运输：干冰运输
供体：全人源，严格筛选供者，批次间稳定性好，无异源蛋白
检测：低内毒素（≤1.0 EU/mL），不含动物源，安全性高
资质：ISO 9001 认证

02    血小板裂解液
（一）人血小板裂解液（HPL）
人血小板裂解液（Human Platelet Lysate）是一种以健康人血小板为原料，通过物理裂解方式释放血小板内 α 颗粒活性物质而制成的血清替代物（Serum Replacement）。血小板是人体内天然的 "生长因子仓库"，其 α 颗粒中富集了血小板衍生生长因子（PDGF-AA/BB）、转化生长因子 -β（TGF-β）、血管内皮生长因子（VEGF）、表皮生长因子（EGF）、胰岛素样生长因子（IGF-1）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）等数十种促增殖、促迁移的活性蛋白。

（二）制备工艺流程 
原料采集：取自正规渠道来源的全血，进一步分离得到血小板，严格筛查经血传播病原体
裂解处理：采用反复冻融法破碎血小板细胞膜，释放 α 颗粒内容物
澄清过滤：高速离心去除细胞碎片与膜成分，保留可溶性活性蛋白
除菌分装：经 0.22μm 无菌过滤，部分规格辅以去纤维蛋白原工艺处理
质量放行：完成生长因子含量、内毒素、无菌、支原体等全项检测

（三）含肝素 vs 不含肝素 

HPL 产品分为含肝素型与无肝素型（去纤维蛋白原型）两类，核心差异在于纤维蛋白原的去除程度：
含肝素型 HPL：保留血浆中天然纤维蛋白原，使用时需在培养基中添加终浓度约 2 U/mL 的肝素钠，通过抗凝作用防止培养基中 Ca²⁺触发纤维蛋白原凝固形成凝胶。优势是制备工艺简单、生长因子保留更完整；劣势是使用步骤增加，肝素可能对部分细胞实验产生干扰。
无肝素型 HPL：通过氯化钙沉淀或冷沉淀工艺预先去除纤维蛋白原，使用时无需额外添加肝素，培养基不会发生凝胶化。优势是操作简便、无肝素干扰，更适合药物筛选、凝血相关研究等场景；劣势是工艺复杂度略高。

（四）HPL vs 胎牛血清 vs 人 AB 血清

大量研究证实，在间充质干细胞（MSC）培养体系中，5% 浓度的 HPL 即可达到甚至超过 10% FBS 的促增殖效果，且细胞形态、表面标志物与分化潜能均无显著差异。在 CAR-T 等免疫细胞培养中，HPL 与 AB 血清的慢病毒转导效率相当，同时具备更优的批次稳定性。

人间充质干细胞增殖曲线（从P1扩增至P4）

03    IPHASE 科研级HPL产品特点与参数
IPHASE 汇智和源本次推出的HPL为科研级（RUO）产品，从原料到成品建立了全流程质控体系。
（一）产品特点
1.纯正人源，无动物源
原料全部取自正规渠道来源的全血，并进一步分离得到的血小板浓缩液，生产全程不使用任何动物源成分，是真正意义上的无动物源细胞培养补充剂（Xeno-free Cell Culture Supplement），从根源上消除异种蛋白污染风险。
2.多供体混合，批次稳定
采用多份供体血小板混合工艺，大幅降低个体差异带来的性能波动。每批次产品均提供完整的质量检测报告（COA），确保实验结果的可重复性。
3.高活性生长因子谱
优化的冻融裂解工艺最大程度保留血小板 α 颗粒中的天然生长因子组合，PDGF、TGF-β、VEGF、EGF 等关键因子含量充足，对多种原代细胞与干细胞具有优异的促增殖活性。
4.双规格可选，适配不同场景

标准型（含肝素配方）：性价比高，适配常规细胞培养，使用时添加肝素钠即可去纤维蛋白原型（无肝素）：操作便捷，无需额外添加肝素，适配对肝素敏感的实验体系

（二）技术参数

（三）IPHASE HPL使用流程
1. 产品解冻
• 从 - 20℃冰箱取出，置于 4℃冰箱过夜缓慢解冻或37℃水浴快速解冻（约 1 小时）具体时长依产品规格而定，至完全融化即可。
• 完全融化后轻轻颠倒混匀，避免剧烈震荡产生泡沫
• 解冻后可能出现少量白色絮状沉淀，属纤维蛋白正常析出，不影响使用效果；若需澄清可 3500 g 离心 10 分钟取上清，或配成完全培养基后 0.22 μm 过滤

2. 完全培养基配制（以标准型为例）
• 准备基础培养基（如 α-MEM、DMEM/F12、RPMI 1640 等，根据细胞类型选择），优选IPHASE无血清培养基，IPHASE无血清经过糖、脂质复合物以及重组蛋白优化，比基础培养基具备更优的扩增效果。
• 按5% 体积比加入HPL，即每 100 mL 基础培养基加入 5 mL HPL
• 加入肝素钠至终浓度2 U/mL（去纤维蛋白原型无需此步骤）
• 按需添加谷氨酰胺、双抗等常规添加剂
• 充分混匀后即可使用，配制好的完全培养基 建议4℃保存2周内使用完毕，最长不超过4周，使用及存储时避免污染。

3. 细胞培养操作建议
• 细胞接种密度：间充质干细胞推荐接种密度为 6×10³–8×10³ 个 /cm²，免疫细胞按对应体系常规接种
• 体系转换：从 FBS 体系转换至 HPL 体系时，建议采用梯度适应法（如 75% FBS+25% HPL→50% FBS+50% HPL→100% HPL），使细胞平稳过渡
• 浓度优化：不同细胞系对 HPL 敏感性存在差异，初次使用建议设置 2%、5%、8%、10% 浓度梯度，确定最佳工作浓度
• 传代与换液：按常规细胞培养操作执行，换液周期与 FBS 体系基本一致

4. 储存与注意事项
• 产品收到后应立即置于 - 20℃保存，长期储存建议 - 80℃
• 避免反复冻融，建议分装为单次使用量后冻存
• 全程严格无菌操作，产品仅用于科研实验，不可用于临床诊断或治疗

（四）应用领域

HPL作为高效的血清替代物（Serum Replacement），可广泛应用于各类人源细胞的体外培养与扩增，核心应用场景包括：
1. 间充质干细胞（MSC）培养与扩增

适用于骨髓、脂肪、脐带、胎盘等多种组织来源的 MSC 培养，显著促进细胞增殖并维持干性与多向分化潜能（成骨、成脂、成软骨），是目前 MSC 规模化扩增的主流替代方案。

IPHASE 5%血小板裂解物搭配无血清培养基培养MSC的图片

2. 免疫细胞培养
支持 T 细胞、NK 细胞、CAR-T/CAR-NK 细胞的体外活化与扩增，转染 / 转导效率与 AB 血清相当，同时批次稳定性更优，助力免疫细胞治疗工艺开发。

IPHASE 5%血小板裂解物搭配无血清培养基培养NK细胞的图片

3. 内皮细胞与血管类研究
HPL 中高含量的 VEGF、bFGF 等因子对内皮细胞（HUVEC 等）具有优异的促增殖与促管腔形成作用，广泛应用于血管生成、类器官构建等研究。

4. 诱导多能干细胞（iPSC）培养
配合无血清培养基使用，支持 iPSC 的维持培养与定向分化，降低 FBS 带来的异种蛋白干扰，提升细胞产品的安全性与一致性，建议结合具体实验场景优化使用条件。

5. 外泌体制备与细胞治疗工艺开发
HPL 来源的外泌体背景低、人源化程度高，适合作为细胞培养补充剂用于外泌体生产；同时也是细胞治疗产品工艺开发、IND 申报前研究阶段的理想选择。

6. 原代细胞与 3D 细胞培养
对多种人源原代细胞（成纤维细胞、角质形成细胞等）具有良好的培养效果，也可适配 3D 悬浮培养、类器官培养等新型培养体系，建议结合具体实验场景优化使用条件。

04    常见问题解答
Q1：HPL 培养细胞时出现凝胶 / 絮状沉淀是什么原因？如何解决？
A：这是 HPL 使用中最常见的现象，主要原因是纤维蛋白原与培养基中的钙离子结合发生凝固。• 若使用标准型 HPL：检查是否已按要求添加肝素钠，建议终浓度 2 U/mL；若已添加仍有凝胶，可适当提高肝素浓度至 3-5 U/mL• 若使用去纤维蛋白原型：通常不会出现明显凝胶，少量沉淀属正常蛋白析出主要是冻融引起，建议直接在37度水浴解冻，可有效减少析出。• 已形成凝胶的培养基可通过 0.22 μm 滤膜过滤后继续使用，或 3500 g 离心 10 分钟取上清

Q2：HPL 的最佳使用浓度是多少？浓度越高越好吗？
A：常规推荐浓度为 5%，但并非越高越好。HPL 中生长因子浓度很高，部分细胞（如 MSC）在过高浓度（>10%）下反而会出现生长抑制或分化倾向。建议初次使用时设置 2%-10% 的浓度梯度，根据细胞状态确定最优浓度。多数细胞类型在 5% 浓度下即可达到甚至优于 10% FBS 的培养效果。

Q3：从 FBS 体系换成 HPL，细胞需要适应吗？直接替换可以吗？
A：建议采用梯度适应法平稳过渡，尤其是对血清依赖性较强的细胞。可按 FBS:HPL = 3:1 → 1:1 → 1:3 → 全 HPL 的顺序逐步替换，每步传代 1-2 次。适应性强的细胞（如部分细胞系）也可直接替换，但建议提前做小量预实验验证。

Q4：HPL 解冻后有沉淀正常吗？会影响效果吗？
A：完全正常。HPL 中含有大量血浆蛋白与纤维蛋白成分，冻融后出现微量絮状或颗粒状沉淀属于正常现象，不影响生长因子活性与培养效果。可轻轻混匀后直接使用，若介意外观可离心取上清或配成培养基后过滤。

Q5：HPL 可以用于细胞冻存吗？
A：可以。HPL 可替代 FBS 用于细胞冻存液配制，推荐在冻存液中添加 10%-20% HPL，配合 DMSO 使用，能够有效提升细胞复苏存活率。冻存配方参考：基础培养基 + 10% DMSO+20% HPL。

Q6：IPHASE 的 HPL 是科研级，和 GMP 级有什么区别？
A：目前 IPHASE 推出的为科研级（RUO）产品，满足实验室基础研究与工艺开发需求，原料与生产均执行严格的质量控制标准。GMP 级产品需在符合 GMP 规范的车间生产，并配套完整的批生产记录与溯源体系，主要用于临床级细胞制备。后续 IPHASE 将根据市场需求推进 GMP 级产品管线。

IPHASE 汇智和源始终专注于生物医药领域试剂与工具的研发创新，本次人血小板裂解液新品的推出，进一步完善了细胞培养试剂产品线，为广大科研工作者与生物技术企业提供高性价比的国产替代选择。如需产品试用装或技术咨询，欢迎联系 IPHASE 技术支持团队。

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