彗星试验试剂盒常见问题
2025-01-16
Q: 彗星试验的给药频次是怎么设计,在末次给药后多久进行取材?组织取材前是否有做过灌注处理?还是直接取出组织块清洗后直接进行研磨即可?离心收集细胞这一操作是否有推荐的离心条件?
A: (1)在0h、24h、45h经口灌胃染毒;末次染毒后3小时内进行安乐死,取肝脏中叶细胞制作玻片,染色观察;
(2)组织采集后称重,加入制备缓冲液立即剪碎,冲洗。迅速研磨组织,使用70μm一次性无菌筛网过滤,整个过程在冰上操作。
(3)离心条件:4℃,1500rpm,10min。
Q: 彗星试验试剂盒中缓冲液、细胞悬液、细胞裂解液和碱性电泳液,这几种溶液配制后如何保存,能够保存多久?
A: 缓冲液和细胞悬液,一般是临用前一天或当天配制,冷藏保存,如果是除菌后的,建议保存不超过1周;
细胞裂解液,试验当天配制,冷藏待用;
碱性电泳液,电泳前一天配制,冷藏保存;