外周血单个核细胞（PBMC）制备方法及注意事项 2022-06-14

外周血单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell，PBMC），是指外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞（Lymphocyte）、单核细胞（Monocyte）、树突状细胞（DC）和其他少量细胞。PBMC 可利用健康人或动物供体的外周血，通过 Ficoll 密度梯度离心，磁珠分选等步骤获得，主要包括淋巴细胞和单核细胞。 Ficoll 是蔗糖的多聚体，中性，平均分子量 400,000，当密度为 1.2 g/mL，未超出正常生理性渗透压，也不穿过生物膜。红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重，离心后漂浮于分层液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞，就可从外周血中分离到单个核细胞。 人 PBMC 中不同细胞类型的比例 PBMC 中大部分都是淋巴细胞，包括 B 细胞和 T 细胞，其中 CD3 T 细胞又占了淋巴细胞中绝大部分 (45 - 70%)。这些 T 细胞都处于初始（naive）状态，即已经成熟了但没有受到抗原刺激。 在正常人中，只有非常小的一部分初始 T 细胞会因抗原识别而被激活。同样的 B 细胞也都处于初始状态。相对于淋巴细胞，单核细胞的比例在 10 - 30%，收到刺激之后会发育成树突状细胞 (DC) 或巨噬细胞。干细胞的比例非常低，只有 0.1 - 0.2%，因此很难从全血样本中分离到。 一、外周血单个核细胞（PBMC）制备方法 1. 设备与试剂 全血（以 10 ml 为例） 无菌 PBS 溶液 (pH7.4) 或者生理盐水 蔗糖溶液（Ficoll Pague PLUS) (GE Healthcare Life Sciences #17 - 1440 - 02) RPMI 1640 培养基（Invitrogen） 胎牛血清（FBS）（GIBCO） 双抗 P/S（Penicillin/ Streptomycin) (GIBCO) 二甲亚砜（DMSO）（SIGMA） 预先装好异丙醇的冻存盒 2. 方法/步骤 配制所需的溶液： a. 细胞培养基：RPMI 1640 + 10% FBS+ 1% P/S； b. 细胞冻存液：FBS 中加入 10%DMSO； （1）在离心管中加入淋巴细胞分离液 Ficoll （2）取抗凝外周血（全血）与无菌 PBS 按照 1:1 充分混匀，用移液管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，动作一定要轻，注意保持清楚的界面。外周血，PBS，淋巴细胞分离液最终体积比为 1:1:1。 （3）水平离心 400 g 成×30 分钟（可根据淋巴细胞分离液 Ficoll 或离心机转子要求调整） （4）离心后可看见管内分为三层，上层为血浆和 PBS，下层主要为红细胞和粒细胞，中层为淋巴细胞分离液。在上、中层界面处有一以单个核细胞为主的白色云雾层狭窄带，主要就是单个核细胞，包括淋巴细胞与单核细胞。此外，还含有血小板。 （5）去除部分上层液体，余下约 1 mL，用移液器插到云雾层，吸取单个核细胞。置入另一离心管中，加入 5 倍以上体积的 PBS，离心 300 g×10 分钟，洗涤细胞两次。 （6）末次离心后，弃上清，加入红细胞裂解液，室温孵育 2 分钟，裂解红细胞，可根据情况适当增减时间。 （7）加入 10 mLPBS，离心 300 g×10 分钟，洗涤细胞两次。 （8）末次离心后，弃上清，加入含有 10%FBS 的 RPMI1640，重悬细胞，计数，计算细胞活力。 注意事项 全血溶液可以加在 Ficoll 上层或者下层，但是最终都必须保证两种溶液分层清晰。 分离 PBMC 第一步离心的时候，一定不能设置或设置低水平的制动。否则将分层混乱。 细胞运输与保存 （1）干冰运输，收到细胞后立即转入液氮冻存或直接复苏； （2）T25 瓶运输细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存，具体操作步骤见细胞培养步骤。 PBMC 收到后注意事项： （1）收到 PBMC 细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时反馈。 （2）先不打开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放培养箱静置四小时，稳定细胞状态，切忌在温箱内静置过夜。 （3）静置后镜检，拍照，记录细胞状态。建议传代后也拍照记录细胞生长情况。 （4）贴壁细胞：若细胞密度超过 80%，可正常传代；若未超过 80%，收集细胞瓶内的培养基，留 8 ml 继续培养至 80% 左右再传代，瓶盖可稍微拧松。 （5）细胞瓶内的培养基含血清和双抗，可收集后 4℃ 保存备用，可补加 2% 血清。刚开始传代时建议一半用细胞瓶内的培养基，一半用自备的培养基，使细胞逐渐适应培养条件，以免因不适应而造成生长状态不佳。 （6）细胞胰酶消化液建议使用 PBS 配制。 IPHASE可提供人，猴，犬，大鼠，小鼠等不同种属外周血单个核细胞（PBMC），CD3 +，CD4 +，CD38 +，CD14 +，CD19 +等分选细胞，可按照客户需求多个批次，多个供体细胞。 不同种属 PBMC：人，猴，犬，大鼠，小鼠 人外周血单个核细胞 PBMC Fresh/Frozen 猴外周血单个核细胞 PBMC Fresh/Frozen 比格犬外周血单个核细胞 PBMC Fresh/Frozen 大鼠外周血单个核细胞 PBMC Fresh/Frozen 小鼠外周血单个核细胞 PBMC Fresh/Frozen 购买方式： 电话：400-127-6686 微信：直接扫描右侧微信二维码添加购买

空白生物基质 —— 生物样本分析方法学验证套装 2022-06-14

1    空白生物基质 采自健康受试者或者健康实验动物的空白全血、血清、血浆、胆汁、乳汁、尿液、粪便、肠道内容物、组织脏器、玻璃体液、房水、脑脊液等多种类型的生物基质，统称为空白生物基质。 2    空白生物基质应用 在生物基质分析方法的建立和验证中，需要使用空白生物基质，确保分析方法的准确性及可靠性。空白基质主要用于配制校正标样、制备质控样品用于考察分析方法的特异性、选择性、精密度、准确度、基质效应、回收率、稳定性、稀释线性、干扰效应等。其中检测方法的选择性和基质效应对于空白基质的要求更高。 选择性：是分析方法在空白生物基质中存在潜干扰物质（非特异性干扰）的情况下区分和测定待测物的能力 。 高脂基质选择性的评价应使用至少一种来源的高脂基质。用于验证的基质应尽可能代表实际的试验样品。应尽量从甘油三酯水平异常高的受试者中获得。如果难以获得，虽然不能完全代表实际试验样品，也可以使用加入甘油三酯的基质。 溶血基质选择性的评价应使用至少一种来源的溶血基质，可通过向基质中添加溶血全血（至少 2% V/V）获得，以形成明显可检测的溶血样品。基质效应：基质效应是指由于生物基质中的干扰物质和未识别的成分引起的待测物响应的改变。在方法验证过程中，需要考察不同来源/批次间空白生物基质可能产生的基质效应。 表1 业界主流生物分析方法学验证指导原则关于选择性的描述 表2 业界主流生物分析方法学验证指导原则关于基质效应的描述 3    IPHASE空白基质产品 1)  外源性物质检测常用生物基质 基质类型包括：全血，血清，血浆（不同抗凝剂），脑脊液，乳汁，尿液，胆汁，胃液，粪便，肝组织，脑组织，肾组织，肺组织，卵巢组织，角膜组织，房水，玻璃体液，组织匀浆液等。动物种属包括：食蟹猴，恒河猴，比格犬，SD大鼠，Wistar大鼠，Wistar Han大鼠，ICR（CD-1）小鼠，C57小鼠，Balb/c小鼠，金黄地鼠，豚鼠，小型猪，兔，猫，牛，羊等。 均可提供未用药声明，传染源检测，供体来源等信息，满足各类法规对于空白基质溯源性要求。 2)  内源性物质检测常用生物基质 人工全血、血浆、脑脊液、胃液、小肠液、尿液等。可提供质控报告（含产品成分列表），满足各类法规对于空白基质溯源性要求。 4    新品推介 根据目前业界主流生物分析方法指导原则的要求（详见表1，表2），特推出空白生物基质方法学验证套装，标配6或10个不同供体/批次的主要的空白生物基质见表3。 表3 验证套装产品介绍 产品优势： ①  种类齐全，有完善的供应商体系，可覆盖各种动物种属； ②  有实验动物中心，具备大小动物实验动物使用许可证，SPF级屏障环境及普通环境； ③ 有经验丰富的实验动物专家，可定制化采集客户所需空白基质； ④  完善的质量控制系统，产品质量稳定，产量充足，溯源性好。 混合供体空白基质产品列表 参考资料： 1. 《中国药典》2020年版，9012生物样品定量分析方法验证指导原则。 2. BIOANALYTICAL METHOD VALIDATION M10，ICH，2019。 3.   Bioanalytical Method Validation Guidance for Industry，FDA，2018。 4.    Guideline on bioanalytical method validation，EMA，2011。  IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验，推出了多领域、多种类的高端科研试剂，为药物早期研发提供筛选工具，为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段，为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品。 关    于    我    们 汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购买方式： 电话：400-127-6686 微信：直接扫描右侧微信二维码添加购买

专属血浆，为血浆蛋白结合试验“保驾护航” 2022-06-13

1    药物与血浆蛋白结合 药物和血浆蛋白的结合对药物在体内的分布和转运有重要影响，因此药物蛋白结合率的测定是新药开发过程中的一项重要工作。药物与血浆蛋白结合后很难通过血管壁，故蛋白结合型药物通常没有药理活性。相反，非结合的游离型药物易于透过细胞膜，与药物代谢、排泄以及药效密切相关，具有重要的临床意义。 血浆中与药物结合的蛋白主要有白蛋白（Albumin，65KDa）、脂蛋白（Lipoprotein，200~3400 KDa）、a1-酸性糖蛋白（Alpha acid glucoprotein，44KDa）。白蛋白是血浆中含量最高的蛋白，占血浆蛋白总量的60%，是主要的药物结合蛋白，华法林即是与白蛋白结合的典型代表。 2    血浆在蛋白结合试验中的重要性 药物与血浆蛋白的结合不但受药物理化性质、药物与蛋白质的亲和力、药物相互作用等影响，而且还与血浆息息相关，且血浆往往是试验成败的关键因素。然而，血浆的特性常与以下因素有关： ①  动物种属差异。不同种属动物的血浆对药物的亲和性不同，故造成药物蛋白结合率差异较大。 ②  性别差异。同一种属雌雄动物血浆药物结合蛋白的浓度存在差异，可能会影响到蛋白结合率。如女性体内白蛋白的浓度高于男性，故水杨酸的蛋白结合率女性高于男性。 ③  生理和病理状态。血浆容量及其组成随年龄而改变，故年龄是影响蛋白结合的一个重要因素；机体发生病变时，蛋白结合率也可能发生变化。如新生儿的血浆白蛋白比成人低，药物蛋白结合率亦较低，血浆中游离型药物的浓度相对较高，对药物的敏感程度也较成人高；肾功能不全时，血浆中蛋白含量降低，导致蛋白结合率下降。 因此，稳定、可靠的血浆供应是确保血浆蛋白结合试验顺利进行的保障。 3    IPHASE产品优势 IPHASE/汇智和源根据血浆蛋白结合试验的需求，筛选出了符合试验要求的专属血浆，为试验的顺利进行提供了保障。 l  多种属 本公司可提供猴、犬、大鼠、小鼠等种属不同抗凝剂的血浆，满足客户需求。 l  特定方式 试剂盒各成分均经过严格的质量检测，实验结果准确、可靠、重现性高。 l  安全性 采集血浆的动物均经过传染源的检测，使用更安全、放心。 l  溯源性 本公司血浆产品均可提供溯源性证明，为客户免除了后顾之忧。 l  质控数据齐全 本公司使用华法林的蛋白结合率指标作为该实验血浆合格与否的评估标准，所提供血浆的蛋白结合率均符合试验要求（见表1），为试验的成败多加了一个重要保障。 表1 华法林在不同种属血浆中的蛋白结合率 l  可定制 除常规种属血浆外，本公司还可根据客户需求，提供特殊种属血浆的定制服务。 4    相关产品 IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验，推出了多领域、多种类的高端科研试剂，为药物早期研发提供筛选工具，为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段，为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品。 关    于    我    们 汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购买方式： 电话：400-127-6686 微信：直接扫描右侧微信二维码添加购买

悬浮肝细胞、贴壁肝细胞相关产品 2022-06-10

贴壁肝细胞（人，猴，犬，SD大鼠，ICR/CD-1小鼠、兔、猪） 悬浮肝细胞（人，猴，犬，SD大鼠，ICR/CD-1小鼠、兔、猪）   IPHASE/汇智和源可提供悬浮原代肝细胞或贴壁原代肝细胞，包括人，食蟹猴，比格犬，SD大鼠，ICR/CD-1小鼠、小型猪、兔等，单供体或多供体混合，应用领域包括肝细胞代谢稳定性、CYP抑制试验、CYP诱导试验、肝细胞毒性试验等。   085A11.21 悬浮人肝细胞 IPHASE Suspension Human Hepatocytes,Male  085A12.21 贴壁人肝细胞 IPHASE Plateable Human Hepatocytes,Male 085A11.22 悬浮人肝细胞 IPHASE Suspension Human Hepatocytes,Female 085A12.22 贴壁人肝细胞 IPHASE Plateable Human Hepatocytes,Female 085A11.23 悬浮人肝细胞 IPHASE Suspension Human Hepatocytes 085A12.23 贴壁人肝细胞 IPHASE Plateable Human Hepatocyte 085B11.21 悬浮食蟹猴肝细胞 IPHASE Suspension Monkey(Cynomolgus) Hepatocytes,Male  085B12.21 贴壁食蟹猴肝细胞 IPHASE Plateable Monkey(Cynomolgus) Hepatocytes,Male 085B11.22 悬浮食蟹猴肝细胞 IPHASE Suspension Monkey(Cynomolgus) Hepatocytes,Female 085B12.22 贴壁食蟹猴肝细胞 IPHASE Plateable Monkey(Cynomolgus) Hepatocytes,Female 085B11.23 悬浮食蟹猴肝细胞 IPHASE Suspension Monkey(Cynomolgus) Hepatocytes 085B12.23 贴壁食蟹猴肝细胞 IPHASE Plateable Monkey(Cynomolgus) Hepatocyte 085B21.21 悬浮恒河猴肝细胞 IPHASE Suspension Monkey(Rhesus) Hepatocytes,Male  085B22.21 贴壁恒河猴肝细胞 IPHASE Plateable Monkey(Rhesus) Hepatocytes,Male 085B21.22 悬浮恒河猴肝细胞 IPHASE Suspension Monkey(Rhesus) Hepatocytes,Female 085B22.22 贴壁恒河猴肝细胞 IPHASE Plateable Monkey(Rhesus) Hepatocytes,Female 085B21.23 悬浮恒河猴肝细胞 IPHASE Suspension Monkey(Rhesus) Hepatocytes 085B22.23 贴壁恒河猴肝细胞 IPHASE Plateable Monkey(Rhesus) Hepatocyte 085C11.21 悬浮比格犬肝细胞 IPHASE Suspension Dog(Beagle) Hepatocytes,Male 085C12.21 贴壁比格犬肝细胞 IPHASE Plateable Dog(Beagle)Hepatocytes,Male 085C11.22 悬浮比格犬肝细胞 IPHASE Suspension Dog(Beagle) Hepatocytes,Female 085C12.22 贴壁比格犬肝细胞 IPHASE Plateable Dog(Beagle)Hepatocytes,Female 085C11.23 悬浮比格犬肝细胞 IPHASE Suspension Dog(Beagle) Hepatocytes 085C12.23 贴壁比格犬肝细胞 IPHASE Plateable Dog(Beagle)Hepatocytes 085D11.21 悬浮SD大鼠肝细胞 IPHASE Suspension Rat(Sprague Dawley) Hepatocytes,Male  085D12.21 贴壁SD大鼠肝细胞 IPHASE Plateable Rat(Sprague Dawley)Hepatocytes,Male 085D11.22 悬浮SD大鼠肝细胞 IPHASE Suspension Rat(Sprague Dawley) Hepatocytes,Female 085D12.22 贴壁SD大鼠肝细胞 IPHASE Plateable Rat(Sprague Dawley)Hepatocytes,Female 085D11.23 悬浮SD大鼠肝细胞 IPHASE Suspension Rat(Sprague Dawley) Hepatocytes 085D12.23 贴壁SD大鼠肝细胞 IPHASE Plateable Rat(Sprague Dawley)Hepatocytes 085E11.21 悬浮ICR/CD-1小鼠肝细胞 IPHASE Suspension Mouse(ICR/CD1) Hepatocytes ,Male 085E12.21 贴壁ICR/CD-1小鼠肝细胞 IPHASE Plateable Mouse(ICR/CD1) Hepatocytes,Male 085E11.22 悬浮ICR/CD-1小鼠肝细胞 IPHASE Suspension Mouse(ICR/CD1) Hepatocytes ,Female 085E12.22 贴壁ICR/CD-1小鼠肝细胞 IPHASE Plateable Mouse(ICR/CD1) Hepatocytes,Female 085E11.23 悬浮ICR/CD-1小鼠肝细胞 IPHASE Suspension Mouse(ICR/CD1) Hepatocytes 085E12.23 贴壁ICR/CD-1小鼠肝细胞 IPHASE Plateable Mouse(ICR/CD1) Hepatocytes   配套产品： 悬浮肝细胞培养基-复苏培养基 贴壁肝细胞培养基-复苏培养基+维持培养基+铺板培养基 胶原包被板 相关产品： 微粒体（肝微粒体、肠微粒体、肾微粒体、肺微粒体等） S9（肝S9、肠S9、肾S9、肺S9等） 胞质液/细胞浆（肝胞质液、肠胞质液、肾胞质液、肺胞质液等） CYP450重组酶（CYP1A2、CYP2A6、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A4） UGT重组酶（UGT1A1、UGT1A3、UGT1A4、UGT1A6、UGT1A7、UGT1A8、UGT1A9、UGT1A10、UGT2B7、UGT2B15、UGT2B17） 转运体   购买方式： 电话：400-127-6686 微信：直接扫描右侧微信二维码添加购买

菌株——Ames试验的“剖析者” 2022-05-31

1    Ames试验简介 Ames试验，亦称细菌回复突变试验（Bacterial Reverse Mutation Test)，于1975年由美国加利福尼亚大学伯克利分校生化系B.N.Ames教授实验室建立并不断发展完善，至今已成为国际上通用的遗传毒理评价体系的必检项目，同时也是许多遗传毒理学新兴技术发展过程中对照验证结果的试验之一，广泛应用于化合物的致突变性和潜在致癌性的初筛检验。当前，Ames试验在食品、药品、化学品、化妆品、农药、医疗器械等多个领域中得到了广泛的应用，成为产品研发和申报阶段必须开展的遗传毒性试验。 Ames试验是利用鼠伤寒沙门氏菌或大肠杆菌营养缺陷型菌株与被检测化合物共培养，如果化合物有一定的致突变性，则可使缺陷型菌株发生回复突变，重新突变为野生型。野生型菌株自身能合成组氨酸/色氨酸，能在无组氨酸/色氨酸的培养基上生长并形成菌落，营养缺陷型菌株自身不能合成组氨酸/色氨酸，不能在无组氨酸/色氨酸的培养基上形成菌落，据此可评价受试物的致突变性。 2    Ames试验菌株 Ames试验是以营养缺陷型的突变体菌株为指示生物检测基因突变的体外试验，常用的菌株有组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌或色氨酸缺陷型大肠杆菌。 2.1 菌株基因型和突变类型 2.2 不同研究领域的Ames试验的菌株组合 表1 不同研究领域的Ames试验的菌株组合比较 3    IPHASE Ames试验产品 IPHASE/汇智和源以各领域细菌回复突变试验的国家标准和指导原则为技术资料，整合了各标准中诱导S9制备方法、Ames试验菌株组合、标准诱变剂选择和相关试剂的浓度要求等技术要素，在不断的试验和优化过程中形成了遗传毒性Ames试剂盒及相关产品，助力于食品、药品、化妆品、化学品、医疗器械和农药等的致突变作用的研究。 4    IPHASE产品优势 l  便捷 省去诱导S9制备、试剂配制和菌悬液制备的时间，可以直接使用，大大缩短了实验周期。 l  准确 试剂盒各成分均经过严格的质量检测，实验结果准确、可靠、重现性高。 l  应用广 应用范围广，可用于食品、药品、化妆品、化学品、医疗器械、农药等的遗传毒性研究。 l 定制服务 可根据客户需求提供定制产品。 IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验，推出了多领域、多种类的高端科研试剂，为药物早期研发提供筛选工具，为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段，为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品。 5    相关产品 关    于    我    们 汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购买方式： 电话：400-127-6686 微信：直接扫描右侧微信二维码添加购买

空白全血，空白外周血——空白生物基质 2022-05-27

在生物样品分析过程中，如采用质谱方法进行试验时，需要考察基质效应。在考察基质效应的过程中，需使用至少6批来自不同供体的空白基质。我们可根据客户需求提供混合或单供体的空白基质。 IPHASE/汇智和源可提供不同动物种属空白全血、血浆、血清，包括大鼠全血，小鼠全血，比格犬全血，猴全血，兔全血，猪全血等，另外还可提供特殊动物种属空白基质定制采集服务。 产品： 空白大鼠全血    Rat Whole Blood  SD大鼠，Wistar大鼠 空白小鼠全血    Mouse Whole Blood  ICR/CD-1小鼠，C57小鼠，BALB/c小鼠 空白比格犬全血  Beagle Dog Whole Blood 空白猴全血      Monkey Whole Blood  食蟹猴 恒河猴 空白兔全血      Rabbit Whole Blood  新西兰兔 空白猪全血      Minipig Whole Blood 巴马小型猪 其他全血定制 空白基质： 全血，血清，血浆，脑脊液，乳汁，尿液，胆汁，胃液，粪便，肝组织，脑组织，肾组织，肺组织，卵巢组织，角膜组织，房水，玻璃体液，组织匀浆液等。 动物种属：  食蟹猴，恒河猴，比格犬，SD大鼠，Wistar大鼠，Wistar Han大鼠，ICR/CD-1小鼠，C57小鼠，BALB/c小鼠，金黄地鼠，豚鼠，小型猪，兔，猫，牛，羊等。  购买方式： 电话：400-127-6686 微信：直接扫描右侧微信二维码添加购买

空白血清——空白生物基质 2022-05-27

在生物样品分析过程中，如采用质谱方法进行试验时，需要考察基质效应。在考察基质效应的过程中，需使用至少6批来自不同供体的空白基质。我们可根据客户需求提供混合或单供体的空白基质。  IPHASE/汇智和源可提供不同动物种属空白血清，包括大鼠血清，小鼠血清，比格犬血清，猴血清，兔血清，猪血清等，另外还可提供特殊动物种属空白基质定制采集服务。 产品： 空白大鼠全血    Rat Whole Blood  SD大鼠，Wistar大鼠 空白小鼠全血    Mouse Whole Blood  ICR/CD-1小鼠，C57小鼠，BALB/c小鼠 空白比格犬全血  Beagle Dog Whole Blood 空白猴全血      Monkey Whole Blood  食蟹猴 恒河猴 空白兔全血      Rabbit Whole Blood  新西兰兔 空白猪全血      Minipig Whole Blood 巴马小型猪 其他全血定制 空白基质： 全血，血清，血浆，脑脊液，乳汁，尿液，胆汁，胃液，粪便，肝组织，脑组织，肾组织，肺组织，卵巢组织，角膜组织，房水，玻璃体液，组织匀浆液等。 动物种属：  食蟹猴，恒河猴，比格犬，SD大鼠，Wistar大鼠，Wistar Han大鼠，ICR/CD-1小鼠，C57小鼠，BALB/c小鼠，金黄地鼠，豚鼠，小型猪，兔，猫，牛，羊等。  购买方式： 电话：400-127-6686 微信：直接扫描右侧微信二维码添加购买

磁性细胞分选技术 2022-05-27

磁性细胞分选（MACS）是一种20世纪70年代发展起来的相对高效简便的细胞分选方法，所需设备和操作较为简单，对操作人员的技术要求也不高，只是让细胞处于一个低磁场中，基本可以忽略对细胞的影响，分离得到的细胞具有较高的复苏率及细胞活性，对于下游应用影响较小，在保持细胞活性方面优于流式分选，是细胞分选的首选方法，具有潜在的应用前景。 1    磁性细胞分选原理 磁性细胞分选是基于免疫学中抗原抗体之间特异性结合的原理进行的。以磁性微粒作为载体，对其进行抗体或亲和配体包被，形成免疫磁性复合微粒，当其与混合细胞孵育后，磁性微粒表面抗体会与细胞表面的抗原决定簇发生抗原抗体的特异性反应，使得细胞被磁性复合微粒标记。在外加磁场的作用下，抗体与磁珠相连的细胞会因磁珠的磁性而滞留在磁场中，而不表达此抗原的细胞因不能与磁珠表面的特异性抗体结合而没有磁性，不能够在磁场中滞留，从而使目的细胞与非目的细胞分开，得到较高纯度的目的细胞。 图1 免疫磁性细胞分选原理示意图 2    磁性细胞分选分类 根据分选过程中所标记细胞类型的不同将免疫磁性细胞分选系统分为阳性分选、阴性分选和复合分选三种。 阳性分选，即将目的细胞亚群直接从细胞悬液中分离出来。通过磁珠包被目的细胞的特异性抗体与混合细胞悬液孵育，在抗原抗体发生特异性结合后，通过磁分离方式，将目的细胞分离出来。 阴性分选，即从多细胞悬液中分离去除非目的细胞而得到目的细胞的一种方法。此方法的优点在于整个分选过程中目的细胞都未与磁珠结合。由于抗原抗体的结合可能会引起细胞膜表面的信号传递，因此，此法具有较大的优势。但同时此方法也有不足之处，当靶细胞的细胞数所占细胞比例较小时，分选过程中存在的非特异性吸附会直接导致目的细胞的损失，此外，非目的细胞未被充分去除等，都会使得细胞的分选效率和分选纯度较低。

肠微粒体在药物代谢中的应用 2022-05-23

1    肠代谢与肠微粒体 药物被机体吸收后，在体内各种酶以及体液环境作用下发生化学结构的改变的过程，称为药物代谢（Drug metabolism），又称生物转化（Biotransformation）。药物代谢主要在肝中进行，也发生在肠、肾、肺、血液和皮肤等器官，尤其是药物的肠代谢越来越受到人们的关注。口服药物主要经小肠和大肠吸收进入肠毛细血管床，它是药物进入体内的一条重要途径，但研究发现许多药物通过肠道时即被代谢，这种肠道的首过效应往往造成进入体循环的实际药量减少，从而导致药物的生物利用度降低。 肠道中药物代谢酶主要分布于上皮细胞，中绒毛尖端活性最强，然后朝着腺窝方向逐渐降低，十二指肠和空肠的代谢活性高于回肠和结肠。肠微粒体是肠黏膜在匀浆和差速离心过程中获得的由破碎的内质网自我融合形成的亚细胞结构，包含I相代谢酶和II相代谢酶，故肠微粒体在体外药物的代谢研究中得到了广泛应用。 2    IPHASE肠微粒体产品 胃肠壁是口服药物首过代谢的重要部位，通常与CYP450酶和UGT酶有关。然而，肠道中酯酶活性的贡献在药物代谢中也可能非常显著。因此，如需研究CYP450酶和UGT酶的代谢，则需排除酯酶代谢对试验结果的影响。IPHASE/汇智和源采用肠道洗脱和蛋白酶抑制剂相结合的方法，经过不断的摸索和优化，在肠微粒体生产过程中尽可能的抑制了酯酶的活性，而保护了肠道亚细胞组分中大多数的CYP450酶和UGT酶的活性，现已形成猴、犬、大鼠和小鼠四个种属的高酶活、稳定性好的肠微粒体自研产品。 3    IPHASE肠微粒体产品竞品对比 IPHASE/汇智和源使用相同的孵育条件，将自研产品和进口同类产品的肠微粒体主要监测指标进行了比对，如CYP450酶活性、NADPH-cytochrome c reductase活性等，结果发现，进口产品和自研产品酶活均在接受范围以内，且自研产品的酶活可达进口产品的2倍以上，实现了进口产品的替代。 4    IPHASE产品优势 l 酶活高 酶活高于同类进口产品。 l  批量生产 采用批量生产方式，库充充足，可保证同一批次产品的供应。 l  货期短 国内现货，保障客户使用需求。 l 售后服务机制健全 有专业技术人员为客户提供全方位服务。 l 定制服务 可根据客户需求提供定制产品。 IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验，推出了多领域、多种类的高端科研试剂，为药物早期研发提供筛选工具，为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段，为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品。 5    其他相关产品 关    于    我    们 汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。 购买方式： 电话：400-127-6686 微信：直接扫描右侧微信二维码添加购买

小鼠外周血单个核细胞的应用 2022-05-20

小鼠外周血单个核细胞采用密度梯度离心法结合差速贴壁法分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中首次提出外周血这一新概念。 单核细胞起源于骨髓中的造血干细胞，并在骨髓中发育。当它们从骨髓进入血液时仍然是尚未成熟的细胞。与其他血细胞比较，单核细胞内含有更多的非特异性脂酶，并且具有更强的吞噬作用。单核细胞在血液中停留2-3天后迁移到周围组织中，细胞体积继续增大，直径可达50-80μm，细胞内所含的溶酶体颗粒和线粒体的数目也增多，成为成熟的细胞。 小鼠外周血单个核细胞 固定在组织中的单核细胞称为组织巨噬细胞，它们经常大量存在于淋巴结、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的单核细胞和组织巨噬细胞能生成并释放多种细胞毒、干扰素和白细胞介素，参与机体防卫机制，还产生一些能促进内皮细胞和平滑肌细胞生长的因子。在炎症周围单核细胞能进行细胞分裂，并包围异物。 应用[4][5] 用于苯短期重复染毒对小鼠外周血单个核细胞及脾脏免疫功能的影响研究 通过构建苯染毒小鼠模型,从免疫器官、免疫细胞和免疫分子等多个水平研究苯染毒对小鼠外周血单个核细胞及脾脏的免疫毒性,为进一步探究苯的免疫毒性效应及其作用机制提供实验研究依据。 方法:1.将40只6-8周龄的雄性无特定病原体级BALB/c小鼠随机分为4组:对照组（玉米油）、低剂量组（50mg/kg）、中剂量组（150mg/kg）和高剂量组（500mg/kg）,每组10只。每天经口灌胃1次,每周5天,连续4周。染毒期间每周观察记录小鼠体重变化,末次染毒24小时后进行各项指标的检测。 2. 采取小鼠的外周血进行血常规分析;使用酶联免疫吸附试验测定血浆中免疫球蛋白G、白介素-2和白介素-6的含量;使用Mito SOX荧光染料结合流式细胞术测定小鼠外周血单个核细胞线粒体ROS含量,使用ATP测定试剂盒和BCA蛋白测定试剂盒测定小鼠外周血单个核细胞ATP的含量;使用硫代巴比妥酸法测定丙二醛的含量、二硫代二硝基苯甲酸法测定谷胱甘肽过氧化物酶的活力、羟胺法测定总超氧化物歧化酶的活力。 3. 无菌解剖小鼠,摘取脾脏并计算脾脏系数,并对小鼠脾脏进行病理学检查;使用TUNEL检测试剂盒检测脾脏细胞的凋亡情况;使用Cell Counting Kit-8试剂盒测定小鼠脾脏中T、B淋巴细胞增殖能力。 4.应用同位素标记相对和绝对定量技术分析比较高剂量组和对照组中小鼠的脾脏蛋白质表达差异,利用Gene Ontology和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes数据库对差异蛋白进行生物信息学分析,找出关键差异表达蛋白并应用Wes全自动蛋白定量分析系统和实时荧光定量PCR技术验证差异蛋白及其相应的mRNA表达水平。#细胞# 参考文献 [1]Carcinogenicity of benzene[J].Dana Loomis,Kathryn Z Guyton,Yann Grosse,Fatiha El Ghissassi,Véronique Bouvard,Lamia Benbrahim-Tallaa,Neela Guha,Nadia Vilahur,Heidi Mattock,Kurt Straif.The Lancet Oncology.2017(12) [2]Regulation of Signal Transduction by Reactive Oxygen Species in the Cardiovascular System[J].David I.Brown,Kathy K.Griendling.Circulation Research.2015(3) [3]Benzanthrone induced immunotoxicity via oxidative stress and inflammatory mediators in Balb/c mice[J].Prachi Tewari,Ruchi Roy,Sakshi Mishra,Payal Mandal,Ashish Yadav,Bhushan P.Chaudhari,Rajnish K.Chaturvedi,Premendra D.Dwivedi,Anurag Tripathi,Mukul Das.Immunobiology.2014 [4]Diamond–Blackfan anemia with mandibulofacial dystostosis is heterogeneous,including the novel DBA genes TSR2 and RPS28[J].Karen W.Gripp,Cynthia Curry,Ann Haskins Olney,Claudio Sandoval,Jamie Fisher,Jessica XiaoLing Chong,Lisa Pilchman,Rebecca Sahraoui,Deborah L.Stabley,Katia SolChurch.Am.J.Med.Genet..2014(9) [5]胡辉.苯短期重复染毒对小鼠外周血单个核细胞及脾脏免疫功能的影响[D].军事科学院,2019. 购买方式： 电话：400-127-6686 微信：直接扫描右侧微信二维码添加购买